山羊痘病毒毒力因子KLP1互作蛋白的筛选与初步鉴定
2021-06-17童剑军何川川张雪萍杨勇飞李有文
高 娜,童剑军 ,何川川 ,张雪萍 ,杨勇飞 ,李有文*
(1.塔里木大学 动物科学学院,新疆 阿拉尔 843300;2.新疆生产建设兵团 塔里木畜牧科技重点实验室,新疆 阿拉尔 843300;3.塔里木大学 生命科学学院,新疆 阿拉尔 843300)
羊痘是由羊痘病毒(capripoxvirus,CaPV)引起的山羊、绵羊的一种急性、热性接触性传染病[1],临床表现为体温升高、鼻炎、皮肤呈红斑,严重时出现脓疮和疱疹等症状。本病世界各地均有发生,以非洲北部和中部、印度次大陆和亚洲的部分国家流行尤为严重[2],我国多省份都有相关报道。本病为Ⅰ类疫病常呈暴发性流行,进入21世纪羊痘流行呈上升趋势,严重影响畜牧业生产及畜产品的国际贸易,给全球经济造成重大损失。
羊痘病毒是DNA病毒,基因组长达到150 kb,呈双股线形,是唯一在细胞浆内复制DNA病毒[3]。羊痘病毒属(capripoxvirus)包括绵羊痘病毒(sheeppoxvirus,SPPV)、山羊痘病毒(goatpoxvirus,GTPV)和皮肤疙瘩病病毒(lumpyskindiseasevirus,LSDV) 3个种,各毒种之间全基因核苷酸序列具有97%的同源性[4]。CaPV基因组含有147个(LSDV有156个)开放阅读框(ORFs),分为中间保守区(024~123ORFs)和两端侧翼区(ORFs001~123和ORFs124~147)。侧翼区主要通过编码与病毒的毒力或种属相关的蛋白来参与病毒的修饰或逃避宿主免疫识别反应[5]。其中有3个Kelch-likeprotein(KLP),分别是019,144和151ORFs(KLP1、KLP2、KLP3)。在进化过程中Kelch蛋白结构域十分的保守[6]。多个重复的Kelch基序所编码的蛋白称为Kelch样蛋白。每个KLP蛋白由3~7个不等的Kelch基序构成,每个Kelch重复结构元件由44~56个氨基酸长度的重复序列构成,里面包含8个高度保守的氨基酸[7]。结构分析证明它是由2个结构域组成无跨膜区,有2个较明显的疏水区。
酵母双杂交技术较灵敏简单快速而被广泛应用于筛选未知的互作蛋白。……
