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表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组耐热新城疫病毒的构建及免疫原性

2021-06-17王红琳罗青平邵华斌潘兹书温国元

中国兽医学报 2021年5期
关键词:小鼠

李 丽,赵 康,张 媛,王红琳,罗青平,邵华斌,2,潘兹书,温国元,2*

(1.湖北省农业科学院 畜牧兽医研究所,湖北 武汉 430064;2.农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室,湖北 武汉 430064;3.武汉大学 生命科学学院,湖北 武汉 430074)

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科,为单股负链闭合环状DNA病毒,是目前所发现最小的动物病毒[1]。PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的重要病原[2-4],发生PMWS疾病的猪群死亡率达5%~30%[5]。PCV2的感染会导致猪群免疫力下降,造成严重的免疫抑制。其和细小病毒、猪肺炎支原体、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒等病原共同感染使猪群产生圆环病毒相关疾病[6-8],给全球养猪业造成了巨大的经济损失[ 2,9-10]。PCV2在PK-15细胞上增殖滴度较低,且不引起细胞病变,给常规灭活疫苗的研发与生产带来很大的困难[11],因此,PCV2基因工程疫苗的研发是当前研究的热点之一。

PCV2基因组全长约1.7 kb,有2个主要的功能性开放阅读框(opening reading frame,ORF)。ORF1编码2个滚环复制相关蛋白(Rep和Rep′)[12],ORF2编码大小约为28 kDa的PCV2 衣壳蛋白Cap[13]。研究表明Cap蛋白是PCV2的主要免疫原蛋白,包含高度保守的抗原表位,能刺激机体产生PCV2特异性中和抗体[7-8]。Cap蛋白是用于研发PCV2基因工程疫苗的首选蛋白[14]。

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属,为单股负链RNA病毒。随着反向遗传操作系统的发展,重组NDV已成为一类研究深入且应用前景广阔的基因工程载体疫苗。目前已经有多种病毒的保护性抗原基因在NDV中得到高效表达[15-17]。在哺乳动物体内存在的免疫力和母源抗体不会影响NDV的复制,NDV在许多动物模型中具有较高的安全性[18]。……

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