岳慧贤,张艳艳,陈 腾,杨金金,杨金梅,郭晓盼,张 菲,张守峰,王 颖,韩 栒,扈荣良

(军事科学院 军事医学研究院 军事兽医研究所,吉林 长春 130122)

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的家猪和野猪的烈性传染病。2018年8月初，非洲猪瘟疫情传入我国并迅速传播，防控形势十分严峻。由于该病给我国的养猪业造成了巨大的经济损失，在我国目前客观条件下，开发安全可靠的疫苗已成为防控的关键。研究中的非洲猪瘟疫苗主要包括灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗等[1]，其中减毒活疫苗是目前效果最好的候选疫苗。在减毒活疫苗生产工艺研究中，减毒株的培养及病毒滴度的提高是其中关键。

据报道，尽管重组ASFV可在某些传代细胞系复制，但均无法进行连续稳定传代和高滴度培养增殖。原代肺泡巨噬细胞和骨髓细胞是目前用来分离和培养ASFV的主要培养介质[1,2]。我们在原代细胞的分离培养过程中发现，即使是SPF猪，因呼吸系统处于开放状态，其肺泡巨噬细胞的微生物污染情况仍较为严重，存在如猪4型腺病毒、支原体、圆环病毒等污染。相对而言，骨髓处于生理封闭状态，细胞病原体污染轻微，是目前疫苗生产中培养ASFV的理想选择，但以未分化骨髓细胞培养ASFV时，病毒滴度较低，导致实际免疫成本过高。由于ASFV对髓系来源的单核-巨噬细胞(单核细胞、巨噬细胞以及树突状细胞)易感性最强[3]，因而，本研究拟诱导骨髓细胞分化为巨噬细胞或树突状细胞，以提高病毒滴度，优化疫苗生产工艺。……