乳腺癌HER-2免疫组化简易质控芯片的应用
2021-06-17江冬瑞李晓灿黄成晨
王 弦,江冬瑞,李晓灿,黄成晨,吴 强
HER-2基因属于原癌基因,HER-2阳性乳腺癌恶性程度较高且易复发转移。目前国内外已有针对HER-2基因过表达的靶向药物(赫赛汀),可大大降低乳腺癌患者的恶性风险。因此,确定乳腺癌HER-2的状态非常重要。针对HER-2的检测方法主要有免疫组化法和原位杂交法,原位杂交法中荧光原位杂交法效果最佳,其是直接针对HER-2基因扩增检测,并设置了17号染色体着丝粒作为内对照[1-2],但该方法对实验设备、操作人员要求均较高,检测费用是免疫组化法的10~15倍。因此,乳腺癌患者应先行HER-2免疫组化检测,如果判读为2+,可再行荧光原位杂交法检测。然而,国内医院病理科因检测水平参差不齐、主观判读因素及抗体原因,导致HER-2判读为2+的检测可重复性不高。因此,免疫组化法检测乳腺癌患者HER-2表达添加质控对照显得尤为重要。本科室在多年标准化检测HER-2的基础上,利用组织芯片的原理并借鉴成功经验[3],摸索出制作乳腺癌HER-2免疫组化简易芯片对照的方法,可使染色结果判读更为客观,效果良好,现介绍如下。
1 材料与方法
1.1 标本收集2019年1月~2020年4月安徽医科大学第二附属医院病理科存档的乳腺癌手术标本30例作为供体蜡块,患者均为女性。所有标本均经10%中性缓冲福尔马林固定,常规脱水,透明,浸蜡,包埋。
1.2 试剂及设备全自动免疫组化仪;抗HER-2兔单克隆抗体(克隆号4B5,即用型)、UrtalView HRP-Multimer DAB免疫组化检测试剂盒、CC1(pH 9.0)修复液、Reaction Buffer缓冲液、EZ脱蜡液、LCS液盖膜;正电荷黏附载玻片。
1.3 方法
1.3.1供体标本的染色 所有供体蜡块4 μm厚切片,使用正电荷黏附载玻片捞片,65 ℃烤片2 h;……
