张 莹，王 哲，杨向红

乳腺癌是全球女性常见的恶性肿瘤之一，近年乳腺癌的发病率逐年升高，并呈年轻化趋势[1]。有研究发现，曲妥珠单抗对浸润性乳腺癌组织中HER-2基因扩增患者的分子靶向治疗取得较好疗效，因此明确HER-2基因状态对乳腺癌患者治疗尤为重要[2]。目前HER-2检测方法有免疫组化(immunohistochemistry, IHC)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)、显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization, CISH)、双色银染原位杂交(dual-color in situ hybridization, DISH)等。本文采用IHC和FISH两种方法进行HER-2蛋白表达和基因扩增检测，分析其一致性；应用《乳腺癌HER-2检测指南(2014版)》[3](简称旧版指南)和《乳腺癌HER-2检测指南(2019版)》[4](简称新版指南)进行判读，探讨新旧两版指南对判读结果的影响，旨在为临床靶向用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料收集2019年1月～2020年10月中国医科大学附属盛京医院存档的乳腺浸润性导管癌组织石蜡标本698例，其中手术切除标本575例，粗针穿刺标本123例。所有患者均为女性，年龄23～84岁，中位年龄53岁，术前均未接受新辅助治疗。采用IHC和FISH法进行HER-2蛋白表达和基因扩增检测，根据新旧两版指南判读标准，由两位病理医师阅片判读。

1.2 方法

1.2.1IHC 标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，连续3 μm厚切片3张，分别进行HE、IHC、FISH染色。IHC使用HER-2/neu兔单克隆抗体(4B5，罗氏诊断公司)，Ventana BenchMark XT 全自动免疫组化仪检测，每例标本均设有阴、阳性对照。

1.2.2FISH 使用HER-2基因扩增检测试剂盒(北京金菩嘉公司)。(1)石蜡切片65 ℃烤片2 h，常规脱蜡。(2)预处理：100%乙醇脱二甲苯5 min，去离子水3 min，水煮20 min。(3)酶消化：37 ℃预热的胃蛋白酶工作液中消化10 min。(4)梯度乙醇脱水。(5)变性及杂交：滴加探针混合液，盖玻片，封片胶封固，85 ℃ 5 min，42 ℃孵育16～18 h。……