基于BSA-SSR 技术初步筛选与叶用芥菜莱菔硫烷含量相关的分子标记
2021-06-15张丽琴胡靖锋徐学忠杨红丽和江明
兰 梅 张丽琴 胡靖锋 徐学忠 杨红丽 和江明
(云南省农业科学院园艺作物研究所,国家蔬菜改良中心云南分中心,云南昆明 650205)
叶用芥菜(Brassica junceaCoss.var.foliosaBailey)原产于中国,简称叶芥菜,别名青菜、腊菜、春菜等,是十字花科芸薹属芥菜种中以叶片或叶球为产品器官的变种;喜冷凉湿润气候,适应性较强,品种繁多,长江流域以南地区栽培较为普遍(刘佩英,1996)。早在19 世纪80 年代,国际饮食营养及癌症委员会(International Diets Nutrition and Cancer Committees)就建议多食用十字花科蔬菜,因为十字花科蔬菜富含具有化学预防特性的硫苷类物质,可以预防癌症。Fahey 等(2001)研究发现,4-甲基亚磺酰丁基硫苷(RAA)普遍存在于十字花科芸薹属蔬菜中,如芥菜、白菜、青花菜等,其水解产物莱菔硫烷(sulforaphane,SF)是迄今为止在蔬菜中发现的抗癌活性最强的物质。流行病学和小鼠试验结果表明,莱菔硫烷能够显著降低肝癌(Keck et al.,2003)、乳腺癌(Pawlik et al.,2013)、胃癌(Fahey et al.,2002)、前列腺癌(Cho et al.,2005)、结肠癌(Rong et al.,2003)、皮肤癌(Xu et al.,2006)等的发生几率。当前对莱菔硫烷的报道多集中在青花菜上(何洪巨 等,2003;Liang et al.,2006;张婵娟 等,2007),且有研究表明莱菔硫烷/RAA 含量与基因型密切相关(Farnham et al.,2004;Abercrombie et al.,2005;邱海荣 等,2008;谢祝捷 等,2010)。
混合分组分析法(bulked segregant analysis,BSA)又称集群分离分析法,是一种快速检测与目标性状连锁标记的方法(Michelmore et al.,1991),现已广泛应用于动植物抗性基因、生长相关性状的筛选、鉴定等(白素兰 等,2000;严长杰 等,2000;Sun et al.,2009;Tripathi et al.,2009;史 明会,2013)。本试验采用高效液相色谱法(HPLC)测定了叶用芥菜F2单株的莱菔硫烷含量,构建F2混合分离群体(BSA)基因池,进行与莱菔硫烷含量基因连锁的SSR 分子标记研究,以期为叶用芥菜新品种的选育和种质资源创新奠定基础,亦为研究莱菔硫烷的分子调控机制提供理论依据。……
