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定量蛋白质组学在慢性嗜酸细胞性鼻窦炎的应用分析

2021-06-11杨念念杨枝芳周小表卿尚喜

医药前沿 2021年7期

杨念念,杨枝芳,周小表,卿尚喜

(1邵阳市中心医院耳鼻喉科 湖南 邵阳 422000)

(2邵阳市中心医院病理科 湖南 邵阳 422000)

(3邵阳市中心医院检验科 湖南 邵阳 422000)

慢性鼻窦炎(CRS)是一种常见病、多发病,发病机制复杂,病因未明。特别是慢性嗜酸细胞性鼻窦炎(ECRS),主要由嗜酸性粒细胞(Eos)浸润,术后炎症难以控制,复发率高。慢性鼻窦炎分为两种亚型,伴有或不伴有鼻息肉。该分类没有体现表型(炎症特征)和发展趋势(是否易复发),难以实施针对性的治疗。嗜酸性粒细胞(Eos)在鼻黏膜组织中大量聚集,表明其在发病机制中起重要作用[1]。TMT定量蛋白质组结合液相质谱法,选出差异蛋白,分析其作用与功能,为阐明ECRS的发病机制,寻找治疗靶点提供依据。

1.资料与方法

1.1 一般资料

标本采集自邵阳中心医院耳鼻喉科2018年10月—2019年7月收治的12例患者,男6例,女6例。ECRS组4例,非ECRS组4例,正常对照组4例(仅鼻中隔偏曲)。所有患者均无哮喘史或阿司匹林过敏史,术前2周未使用抗生素或激素。所有患者均签署知情同意书。平均年龄为(46.7±1.54)岁。鼻黏膜和鼻息肉标本在鼻内镜下采集固定,在病理科进行标本的组织学形态和Eos的显微镜下观察。另一部分标本用生理盐水快速冲洗,去除血和骨碎片。PBS冲洗后,用锡箔纸包好,放入塑料冷藏管中,-80℃保存。

1.2 方法

1.2.1主要试剂和仪器 蛋白定量试剂盒、TMT试剂购于Thermo Fisher Scientific公司,十二烷基磺酸钠购于Amresco公司,乙腈购于J.T.Baker公司,胰酶购于Gibco公司。其余试剂为国产分析纯级别。

1.2.2提取标本裂解和蛋白定量 样品裂解及蛋白定量:解冻后,用预冷PBS洗涤3次,加入适量的裂解液,电动研磨装置充分匀浆。……

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