谷亮 吴波

(复旦大学附属中山医院青浦分院呼吸内科,上海 201700)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是呼吸内科常见疾病，目前临床上多采用糖皮质激素治疗，改善患者肺功能[1]。有研究指出[2]，长期使用糖皮质激素可能导致患者呼吸道局部粘膜屏障和微环境改变，从而导致微生物组学改变。本文探究高通量测序下吸入性糖皮质激素对老年慢阻肺(COPD)患者痰液微生物组学的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年8月至2020年8月期间我院呼吸内科门诊就诊的60例老年COPD患者作为研究对象，本研究经我院医学伦理委员会批准通过。根据COPD治疗指南将患者分为三组，各20例。A组男13例，女7例，年龄60～78岁，平均年龄(68.2±4.3)岁。B组男12例，女8例，年龄60～76岁，平均年龄(67.6±4.2)岁。C组男10例，女10例，年龄60～79岁，平均年龄(69.5±4.6)岁。纳入标准：经检查和诊断符合COPD诊断标准[3]的患者；年龄≥60岁；首次发作COPD的患者；患者及家属均知情同意。排除标准：入组前使用过抗生素、免疫抑制剂等影响微生物的药物；重度COPD急性加重，需要呼吸机或转ICU治疗的患者；合并恶性肿瘤或其他严重疾病影响研究者。3组患者一般资料比较均无差异(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1标本采集 收集所有患者痰液标本，送至实验室-80℃冰箱保存备用。

1.2.2主要仪器和试剂 仪器：PCR管、EP管、零下80℃冰箱、普通冰箱、PCR扩增仪、高压锅、电泳仪、微量移液器、天平、高速离心机、旋涡振荡器、恒温干燥箱、分光定量分析仪、紫外凝胶成像系统、水平电泳槽等。试剂：DNA磁珠法提取试剂盒、溶菌酶、蛋白酶K、柠檬酸钠、氢氧化钠、无水乙醇、乙酰半胱氨酸、ddH2O、Gel-Red染料、琼脂糖、DL2000DNA maker、SYBR Green Mix、DNA分光定量试剂盒等。