刘东旭，沙万里,尹柏双,李国江*

(1.吉林农业科技学院，吉林 吉林 132101；2.吉林省教育厅预防兽医学吉林省重点实验室，吉林 吉林 132101)

猪圆环病毒(Porcine circoviruses，PCV)是一种无包膜的单链环状DNA病毒，可分为两大类：PCV1和PCV2。PCV1是20世纪70年从猪肾细胞中发现的与临床疾病无关的病毒。相反，PCV2与猪的一系列症状有关，称之为猪圆环病毒相关疾病(Porcine Circovirus Associated Disease，PCVAD)[1]。2016年，美国发现了一种新型圆环病毒-PCV3。研究表明，这种新出现的病毒与猪的急性心肌炎和多系统炎症的临床病例有关[2]。自PCV3在美国发现以来，我国也陆续在湖北、广东、河南、上海等多地发现PCV3[3]。鉴于PCV2过去对我国养猪业造成的巨大危害，PCV3一经发现就引起了我国研究学者的高度重视和密切关注，业界甚至普遍认为PCV3将是继PCV2之后未来几年内危害我国养猪业较为严重的传染病之一。为此，本研究对2017-2019年收集到的吉林部分地区10家规模化猪场的704份血清样品进行检测，进行PCV流行情况调查，较全面的了解吉林地区部分规模化猪场PCV的流行情况，为吉林地区PCV的预防和控制提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

病毒DNA提取试剂盒、TaqDNA聚合酶(含10 x Buffer 25mmo1/LMCl2)、dNTP购自宝生物工程(大连)有限公司溴化乙啶(EB)、琼脂粉购自维特杰公司。

1.2 病料的收集

2017年1月至2019年12月期间，课题组收集吉林地区10家规模化猪场的血清样品704份。同时记录每份样品的基本信息，包括猪的体况、年龄及品种等。

1.3 方法

1.3.1 引物的设计与合成 根据GenBank中PCV2、PCV3保守区进行全基因组序列，合成4对引物，引物序列见表1，引物由长春库美生物工程有限公司合成。……