周建伟 白玉龙 李淼 沈亚俊 李矛

1首都医科大学附属北京同仁医院骨科，北京100730；2苏州微创再生医学科技有限公司215000；3上海亚朋生物技术有限公司201201；4首都医科大学口腔医学院北京口腔医学研究所，北京100050

0 引 言

近年来脱细胞基质一直是研究的焦点和热点。动物源性组织如同种异体或异种骨、皮肤、肌腱、小肠黏膜等组织材料经脱细胞处理后可得到一种生物相容性优良、免疫原性低的支架材料[1-3]。较之大部分合成材料，其具有无法比拟的天然结构，在去除了抗原成分的同时保留了一些对细胞增殖、分化有利的因子，如骨形态发生蛋白、转化生长因子β、血管内皮生长因子等，是一种较为理想的生物支架材料。在组织工程研究领域，脱细胞基质也表现出显著的应用价值[4-5]。

常用的组织脱细胞试剂以十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS）、聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）和硫代甜菜碱10（sulfobetaine 10,SB-10）等表面活性剂为主，其不仅具有清洁组织的作用，对细胞的去除效果也得到了广泛认可[1,6-7]。但上述表面活性剂均具有不同程度的毒性，若清洗不干净，则残留于脱细胞基质中的试剂会对机体造成不同程度的毒副作用[8]。在生物医用材料转化为医疗器械产品的过程中，对于试剂残留也提出了控制要求，应明确试剂残留限度值且试剂残留不应导致细胞毒性。目前，尚未有人系统研究过常用组织脱细胞试剂SDS、Triton X-100和SB-10中一种或多种试剂残留造成细胞毒性的临界浓度。本研究即参照国标GB/T 16886.5中的细胞毒性检测方法，探究不同脱细胞试剂单独或混合使用对小鼠成纤维细胞L-929和小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1两种细胞系的细胞毒性。……