随蓓蓓 李华舜 孟 晓 孙秀玲 刘 莉

(济宁医学院生物科学学院,日照 276826)

三七，别名田七，我国主要生产地为云南、广西等地[1]。三七主要通过其含有的皂苷类物质发挥药用作用[2]。三七总皂苷大多数可分为达玛烷型的20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇2种类型[3]。有研究发现，三七总皂苷能抑制癌细胞增殖、生长、促进癌细胞凋亡[4]。常规化疗手段与三七总皂苷联合使用既能降低化疗手段的副作用又可发挥抗肿瘤的疗效，在临床治疗中对延长患者生存期有重要意义[5]。因此，三七总皂苷对肿瘤治疗有十分重要的临床意义，值得深入研究。

1 材料和方法

1.1 材料

人乳腺癌MDA-MB-231细胞(ATCC)购自上海研生生化试剂有限公司；FBS和DMEM为Gibco产品；三七总皂苷为实验室自提取；细胞凋亡试剂盒和Casepase 3活性检测试剂盒为碧云天产品。人乳腺癌细胞MDA-MB-231使用含FBS 10%的高糖DMEM培养基，37℃、5% CO2条件下进行传代培养。

1.2 方法

1.2.1人乳腺癌细胞MDA-MB-231的活性检测 将细胞接种于96孔板，待铺满细胞培养板80%时开始处理。分别设空白对照组及不同浓度的三七总皂苷处理组。空白对照组加入DMEM培养基，三七总皂苷处理组分别加入终浓度含0.5、1.0、2.0mg/ml三七总皂苷的DMEM培养基。每组每个时间段设置3个平行孔。取出96孔板，将每个待测孔加入20μl MTT溶液(5mg/ml，即0.5% MTT)，37℃、5% CO2孵育4h。终止孵育，弃去孔内溶液，加入适量PBS，清洗两次。每孔精确加入DMSO 150μl，低速振荡10min，酶标仪490nm波长下检测各孔的吸光值。以平均吸光值为纵坐标，以时间为横坐标，绘制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的吸光值曲线。

1.2.2人乳腺癌MDA-MB-231细胞的光镜观察 将细胞接种于6孔板，待细胞铺满80%的时候。……