不同核酸提取方法SARS-CoV-2核酸检测性能比较

2021-06-07张云丽赵鸿梅

检验医学 2021年5期

关键词：检测

张云丽，王鑫，邵玲，曲波，赵鸿梅

（辽宁省人民医院检验医学科，辽宁沈阳 110016）

2020年2月11日，国际病毒分类委员会将新型冠状病毒肺炎（corona virus disease 2019，COVID-19）的致病原命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）[1]。我国国家卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》[2]中规定实时荧光逆转录聚合酶链反应（real-time fluorescence reverse transcription-polymerase chain reaction，RTPCR）检测SARS-CoV-2阳性为COVID-19的确诊指标之一。实时荧光RT-PCR具有灵敏度高、特异性强的特点[3]，在COVID-19早期诊断及阻断疾病传播中起关键作用，为SARS-CoV-2感染的防控提供了强有力的保障[4]。

目前，SARS-CoV-2核酸检测普遍在各医疗机构的二级及以上生物安全实验室开展。大部分实验室在进行SARS-CoV-2核酸检测时都会按照试剂说明书要求使用配套核酸提取或纯化试剂（磁珠吸附法），将采集的鼻/咽拭子置于病毒保存液中，56 ℃灭活30 min后使用自动化设备提取核酸。样本释放剂法是将采集的拭子样本放入含有样本核酸释放剂的保存液中，使样本中的RNA释放，依据液可直接作为聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）模板进行扩增，无需加热灭活或其他核酸提取操作。该法操作更为简便，耗时更短。本研究参照CNAS-CL02-A009《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》[5]、CNAS-GL039《分子诊断检验程序性能验证指南》[6]文件对这2种不同的核酸提取方法所使用的3种试剂进行符合率、重复性、检出限比较，评估样本释放剂是否可替代磁珠吸附法应用于临床，为实验室人员合理选择SARSCov-2 核酸提取方法提供参考。