刘钰，王朝阳，李世朋，胡莎莎，杨爽，蔡金贞，张国梁△

肝缺血再灌注损伤（liver ischemia-reperfusion injury，LIRI）是肝脏切除、移植等手术过程中出现肝损伤和肝移植术后移植物功能障碍的主要原因［1］。了解LIRI的具体机制将有助于减少肝移植术后各种并发症的发生，进一步改善患者的预后［2］。干扰素调节因子-1（interferon regulatory factor-1，IRF-1）参与调节对病原体和同种抗原的炎症反应，已被证实参与了缺血再灌注（IR）损伤的发生［3］。肾小管急性IR损伤时IRF-1表达上调，进而激活促炎细胞因子和趋化因子的表达，引发一系列炎症反应［3］。细胞焦亡作为一种程序性死亡形式越来越受到人们重视，其机制、形态学变化及生化特征均有别于其他死亡形式，主要表现为病原体刺激下激活半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-1和Caspase-4/5/11，以及裂解gasdermin D（GSDMD）和促炎细胞因子的释放［4］，同时伴有细胞肿胀，细胞膜孔形成［5］。目前IRF-1在LIRI中的研究尚少见报道。本文主要探讨LIRI中IRF-1及细胞焦亡指标的变化，同时观察敲低或过表达IRF-1对细胞焦亡的影响及其可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 无特定病原体（SPF）级健康雄性C57BL/6小鼠24只，体质量（24±3）g，8~10周龄，购于北京华阜康生物科技股份有限公司。小鼠正常肝AML12细胞系购于中科院上海细胞库。IRF-1小干扰RNA（siRNA）及阴性对照siRNA购于广州锐博公司，IRF-1 siRNA靶序列：5'-CCAAGACATG⁃GAAGGCAAA-3'。过表达IRF-1腺病毒（IRF-1引物上游5'-ATGCCAATCACTCGAATGCG-3'，下 游5'-CTATGGTG⁃CACAAGGAATGGC-3'）及空载腺病毒购于汉恒生物。DMEM/F12培养基、胎牛血清和胰蛋白酶购于美国Gibco公司。Caspase-1和Cleaved-Caspase-1抗体购于英国Abcam公司。兔抗鼠IRF-1、GSDMD一抗购于武汉ABclonal公司，GAPDH抗体购于武汉Elabscience公司，辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔二抗购于美国CST公司。……