王 瑜，朱明了，何施燕，陈 弘，陈佳玉

（绍兴文理学院医学院，浙江绍兴312000）

弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）是最常见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL），约占NHL的41%［1］。美罗华+环磷酰胺+阿霉素+长春新碱+泼尼松联合用药是目前DLBCL的标准治疗手段，可使患者5年生存率＞71%［2］，但因有明显毒副作用，且＞1/3的患者治疗后会复发［3］，不能实现对DLBCL的完全治疗。对于复发或难治性DLBCL患者，常需干细胞移植，但该法费用贵，供体难寻，排斥率高，有较大风险，且往往只能缓解症状，不能彻底治愈［4］。因此，寻找高效治疗DLBCL的替代药物一直是该领域研究的热点。

紫云英苷（astragalin）属于黄酮类化合物，普遍存在于药用植物中，有抗炎、抗氧化和保护心肌的功能［5-6］。有研究表明，astragalin可通过活化caspase-3而发挥抗黑色素瘤作用［7］，但其抗DLBCL作用尚未见报道。因此，本研究拟观察astragalin对DLBCL细胞系OCI-LY8的作用及其分子机制。

材料和方法

1 实验材料

OCI-LY8细胞为本实验室所保存。清洁级BALB/c小鼠购自于浙江省实验动物中心，动物合格证号为SCXK（沪）2013-0016。Astragalin购自深圳市美荷生物科技有限公司；CCK-8为日本同仁公司产品；Hoechst 33342、BCA蛋白浓度测定试剂盒以及RIPA裂解液（强）均购自上海碧云天公司；AnnexinVFITC/PI双染试剂盒及脱脂奶粉购自BD；胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）、RPMI-1640培养液以及胰蛋白酶均购自Gibco；Ⅰ抗和酶标Ⅱ抗购自武汉博士德生物技术公司；RT-qPCR引物源自上海生工生物公司；Trizol和SuperScript®ⅢFirst-Strand Synthesis System购自Invitrogen；ECL化学发光液购自Sigma。

2 方法

2.1 细胞培养用含10%FBS的RPMI-1640细胞培养液，将处于对数生长期的OCI-LY8细胞浓度调节至8×107/L，分别接种于96孔板（每孔100μL）和6孔板（每孔2 mL）中，均置于37℃、5%CO2条件下培养。

2.2 CCK-8法检测……