于博文，王 雪，胡艳红，杨 静，李雪丽，修成奎，雷 燕△

（1中国中医科学院医学实验中心，北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室，北京100700；2中国中医科学院博士后科研流动站，北京100700）

血管内皮细胞衰老可导致血管功能障碍，是多种血管性疾病及衰老相关性疾病发生的始动因素［1］。除自由基、端粒、抗衰老基因、线粒体损伤、DNA损伤、蛋白质修饰以及热量限制等学说之外，内皮微粒（endothelial microparticles，EMPs）与衰老以及血管性疾病的关系引起了学者们极大的兴趣［2-3］。EMPs是从激活或损伤的内皮细胞上脱落的微小囊泡，其直径约0.1～1μm，含有胞质、膜蛋白、RNA和microRNA，具有母体细胞来源的膜磷脂结构及蛋白质成分，并携带有母体细胞源的膜表面分子标记物［4］。EMPs在生理情况下极少，参与细胞间信息传递，在炎症反应、血管损伤及细胞迁移等过程中发挥重要作用。近几年研究表明，这些经常被忽视的EMPs正逐渐成为内皮功能障碍的潜在指标，是反映内皮损伤的新标记物，其具有促凝活性，能够介导炎症反应［5］，并参与各种病理过程［6-7］。然而，人们对EMPs与血管衰老之间的关系知之甚少，鲜有报道衰老对EMPs分泌的影响及EMPs对内皮细胞衰老的作用。因此，本项工作以复制性人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）衰老为模型，探讨EMPs在HUVECs衰老中的意义及可能机制。

材料和方法

1 材料

1.1 细胞人脐静脉内皮细胞购自ScienCell。

1.2 试剂内皮细胞培养液、胎牛血清、内皮细胞生长因子、青霉素/链霉素溶液、胰酶/EDTA消化液0.05%、细胞冻存液和磷酸盐缓冲液均购自Scien-Cell；细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence-associated beta-galactosidase，SA-β-gal）检测试剂盒购自Cell Signaling Technology；……