枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达
2021-05-28于秀菊韩小涛李钰钰董常生
于秀菊,孙 铮,韩小涛,李钰钰,于 淼,董常生*
(1.山西农业大学动物医学学院,太谷 030801;2.辽宁省疾病预防控制中心,沈阳 110005)
芽胞杆菌是一类常见的革兰阳性细菌,是动植物微生态的优势菌之一,不仅种类繁多,而且来源广泛,存在于土壤、海洋、植被、食物及动物肠道等多种样品中[1-2],其产生的芽胞可在高温、高压、强酸、强碱等多种极端环境中生存,具有较强的耐受能力[3-4]。芽胞杆菌代谢产生的细菌素分为修饰后细菌素(Ⅰ类)、无修饰细菌素(Ⅱ类)和具有磷酸酶活性的大分子蛋白(Ⅲ类),而有些在遗传、分子或氨基酸结构等方面缺乏数据,无法按照分类法进行分类的抗菌蛋白,统称为类细菌素[5]。芽胞杆菌产生的细菌素和类细菌素是继乳酸菌细菌素之后的又一类重要的细菌素[6],与乳酸菌产生的细菌素相比,芽胞杆菌细菌素抗菌谱更广,包括革兰阳性菌、革兰阴性菌、酵母和真菌,并且具有耐酸碱、耐高温的特性。这些特性提示了芽胞杆菌产生的(类)细菌素具有广泛的应用前景[7-8]。
据研究报道,多种芽胞杆菌可以代谢产生细菌素或类细菌素,例如地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)、枯草芽胞杆菌(B.subtilis)、解淀粉芽胞杆菌(B.amyloliquefaciens)、苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis)、蜡样芽胞杆菌(B.cereus)和凝结芽胞杆菌(B.coagulans)等[5]。近十年,从芽胞杆菌中分离出的细菌素或类细菌素有50余种,如Xin等[9]从分离自藏猪肠道的枯草芽胞杆菌TS的发酵产物中纯化到细菌素TP,该细菌素为相对分子质量约1.5 ku的肽,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑菌活性;Ayed等[10]从解淀粉芽胞杆菌An6发酵产物中分离到约11 ku的类细菌素,该类细菌素在pH 4.0~10.0条件下仍具有抑菌活性;……
