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牛胚胎性别鉴定荧光定量PCR方法的优化与应用

2021-05-28冯春涛顾文源王志仙赵增元朱宏波倪俊卿褚素乔余文莉李树静

畜牧兽医学报 2021年5期
关键词:方法

冯春涛,顾文源,王志仙,赵增元,7,朱宏波,倪俊卿,褚素乔,余文莉*,李树静*

(1.石家庄天泉良种奶牛有限公司,石家庄 050200;2.石家庄市畜牧技术推广站,石家庄 050000;3.河北省动物疫病预防控制中心,石家庄 050035;4.河北省畜牧良种工作总站,石家庄 050020;5.河北省牛产业技术研究院,石家庄 050200;6.河北省奶牛良种繁育工程技术研究中心,石家庄 050200;7.河北省第三批“巨人计划”创新创业团队,石家庄 050200)

在畜牧业生产中,许多生产性状受性别控制,后代性别预选为提高畜牧业系统的盈利能力和可持续性提供了机会[1]。奶牛作为重要的经济动物,只有母牛可以产奶,性别决定和性别控制对奶业生产具有重要意义[2]。在奶牛胚胎移植行业中,胚胎性别鉴定是一项强有力的工具,可以帮助奶牛养殖者更有效地管理其育种资源[3]。为了控制后代的性别,必须对植入前的胚胎进行有效的性别鉴定[4]。早期胚胎性别鉴定方法主要有细胞学方法、免疫学方法、分子生物学方法等[5]。20世纪80年代中期,牛Y染色体特异性DNA探针的鉴定,以及随后聚合酶链式反应(PCR)技术的发展,使得胚胎的性别鉴定理论成为现实[6]。近几年的研究表明,牛的雄性和雌性胚胎不仅在染色体补体上有差异,而且在转录活性和表观遗传状态上也有差异。胚胎转录中的两性异形影响碳水化合物和氨基酸代谢,雌性胚胎显示较慢的线粒体代谢[7],这提供了一条通过无创代谢组学进行胚胎性别标记测定的新思路。Hamilton等[8]用RT-PCR或RT-qPCR法性别鉴定的8个Y染色体关联基因中的3个基因(DDX3Y-1、USP9Y-1、ZRSR2Y-1)代表了基于RNA胚胎性别鉴定的良好候选基因,并且可以代替基于DNA的性别鉴定步骤。……

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