陆滢雪 罗新华 程明亮 彭 虹 （贵州医科大学附属医院感染科，贵阳550004）

近年来，环状RNA（circRNA）的功能备受关注，如调节亲本基因表达、发挥miRNA海绵体等作用［1-3］。研究表明，circRNA参与肿瘤发生发展［4-5］。原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是全球恶性肿瘤相关死亡的常见原因，预后差、复发率高，其发病机制受到高度关注［6-7］。最新研究表明，大量circRNA在HCC组织和正常肝组织中存在差异表达，与HCC发生发展和预后密切相关，但具体作用机制尚未明确［8-10］。本文就circRNA在HCC中的异常表达进行分析，探讨其在HCC中的作用和潜在机制。高通量测序发现，circTMBIM1在HCC组织中表达上调，因此，课题组对Hsa-circTMBIM1在HCC细胞系中的表达进行RT-PCR定量分析，并设计合成靶向Hsa-circTMBIM1的小干扰RNA（siRNA），将其转染至Huh7细胞，研究Hsa-circTMBIM1与Huh7细胞增殖和迁移的关系。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系 人HCC细胞株HepG2、Hep3B、Huh7、Sk-hep-1、HCCLM3、SMMC-7721购自上海生命科学院所；慢病毒稳转细胞株由南京科佰生物科技有限公司提供；引物由北京擎科生物有限公司合成；靶向circTMBIM1的siRNA序列委托广州锐博生物公司设计合成；

1.1.2 主要试剂与仪器 DMEM细胞培养基（美国Hyclone公司）；胎牛血清（美国Gibco公司）；青-链霉素（武汉苑陵生物科技有限公司）；miR-24-3p模拟物（上海吉玛生物有限公司）；miR-24-3p抑制剂和阴性对照（上海生工生物公司）；CCK-8试剂盒（日本Dojindo公司）；结晶紫染色液（碧云天公司）；碘化丙啶、Lipofectamine 3000转染试剂盒、荧光素酶报告基因质粒（美国Sigma公司）；Transwell小室（美国Coster公司）；Trizol试剂（美国Invitrogen公司）；酶标仪（美国Thermo公司）；Muse智能触控细胞分析仪（美国默克密理博公司）；荧光定量PCR仪（美国ABI公司）；双荧光素酶报告基因测定系统（Promega，Madison，WI，USA）。

1.2 方法……