陈咏丽 董善武 蒋 姝 刘 娜 陶 双

（武汉市第四医院，华中科技大学同济医学院附属普爱医院儿科，武汉430030）

支气管哮喘是近年备受关注的全球公共卫生问题，也是儿童最常见的慢性疾病，以气道反应性增强、气道发炎和气道重塑为特征［1］。近年来，儿童哮喘发病率呈升高趋势，已严重影响儿童的健康和生长发育［2］。因此，对儿童哮喘的早期诊断和干预具有重要意义。近年研究显示，长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在哮喘的进展中发挥重要生物学作用，靶向lncRNA是治疗哮喘的新方向［3］。前列腺癌基因表达标记物1（prostate can‐cer gene expression marker 1，PCGEM1）基因位于染色体2q32.3，研究显示PCGEM1在前列腺癌、结肠癌等恶性肿瘤中表达上调，干扰PCGEM1可抑制肿瘤细胞的增殖和迁移，是恶性肿瘤的潜在治疗靶点［4-5］。对哮喘患者血清中差异性表达的lncRNA进行初步筛选发现，PCGEM1呈低表达，是临床检测哮喘潜在的新型分子标记物［6］。支气管上皮细胞是气道抵抗外部环境的物理屏障，其功能障碍在哮喘的发病机制中起重要作用，但PCGEM1对哮喘患者支气管上皮细胞增殖、凋亡的影响尚未见报道。因此，本研究以尘螨抗原浸出物刺激支气管上皮细胞，通过检测PCGEM1的表达及细胞增殖、凋亡及炎症反应变化，初步探讨PCGEM1在支气管哮喘中的作用，以期为支气管哮喘的治疗提供新途径。

1 材料与方法

1.1 材料 人支气管上皮细胞16HBE购于美国典型菌株保藏中心；MEM培养基和胎牛血清购于美国Gibco公司；安脱达（尘螨抗原提取物）购于丹麦ALKAbello A/S公司；LipofectamineTM2000购于美国Invit‐rogen公司；小干扰RNA阴性对照（si-NC）、PCGEM1小干扰RNA（si-PCGEM1）、空载体（pcDNA3.1）、PC‐GEM1过表达载体（pcDNA3.1-PCGEM1）及PCR引物购于南京金斯瑞生物科技有限公司；……