冯晓丹，毛 雪，王 英，董 秀*

（1.辽宁中医药大学中西医结合学院，沈阳 110847；2.辽宁中医药大学中医药创新工程技术中心，沈阳 110847）

卵巢癌是一种具有复杂分子和基因变化的异质性疾病，由于其缺乏有效预防措施、筛查工具及无症状发展的特点，使其多在癌症晚期才得以确诊，且极易在根治性手术和化疗后复发，故在妇科恶性肿瘤中病死率极高[1]。顺铂（cisplatin，DDP）是第一代铂类抗癌药物，对于包括卵巢癌在内的多种癌症均有显著的抗癌作用，临床运用广泛，但顺铂的内源性和获得性耐药极易造成患者后期疗效不佳，增加复发风险，而对正常细胞过高的毒副作用，也限制了顺铂的临床用药，故顺铂与其他抗癌药物联合治疗已成为许多癌症的新治疗策略[2]。去甲斑蝥素（norcantharidin，NCTD）是虫类中药提取物斑蝥素的衍生物，是近年来抗癌药物的新起之秀，其多靶点、增强免疫反应[3]、逆转耐药[4]等优势，是与顺铂联合用药的较好选择。本实验将应用流式细胞分析、荧光染色和Western blot 方法检测去甲斑蝥素能否增强顺铂对卵巢癌SKOV3 细胞敏感性，为临床用药提供新的治疗策略和依据。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 人卵巢癌细胞株（SKOV3）购于中科院上海细胞库去甲斑蝥素（N8784）；顺铂（货号：P4394-25MG）（美国Sigma 公司）；胎牛血清（FBS）、PBS 磷酸盐缓冲液、RPMI-1640 培养液（美国Hyclone 公司）；MTT（货号：M8180），二甲基亚砜DMSO（货号：D8372），SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒（货号：P1200），普通RIPA 裂解液（组织/细胞）（货号：R0020），BCA 蛋白浓度测定试剂盒（货号：PC0020）购于北京索莱宝科技有限公司；Annexin-FITC/PI 凋亡检测试剂盒（KC0001）购于ImmunoWay Biotechnology；Mito-Tracker Green（线粒体绿色荧光探针）（货号：C1048）购于中国碧云天生物技术有限公司。……