刘 杨 赵向绒 郭春艳 李 研 胡 军

（陕西省人民医院中心实验室，西安交通大学医学院第三附属医院，西安710068）

甲型流感病毒（influenza A virus）属正黏病毒科，流感病毒属，是引起急性呼吸道感染的主要病原体之一，抗原易变异，多次引起世界性大流行，给人类生命健康和经济发展造成极大危害。随着我国经济发展迅速，跨地区交流、合作、旅游等日益频繁，大中型城市扩建及大部分地区城镇化建设逐年增加，城镇人口居住密集，为流感传播提供了有利条件。因此，流感的快速检测、治疗、病毒变异及病毒致病机制研究具有重要意义。特异性单克隆抗体（monoclonal antibody，mAbs）在流感病毒快速检测、动物感染模型保护效果评价及病毒研究领域应用广泛［1-2］。本研究采用A/PR/8/34（H1N1）流感病毒颗粒免疫小鼠制备mAbs，并鉴定抗体特性，评价抗体在免疫荧光、细胞免疫化学染色和ELISA中的作用，为流感快速检测及研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 A/PR/8/34（H1N1）甲型流感病毒为本实验室保存毒株；MDCK细胞为陕西省疾病预防控制中心病毒所惠赠；9日龄SPF鸡胚购自北京实验动物中心；普通鸡胚购自西安华禽养殖场；6～8周龄BALB/c小鼠购自西安交通大学医学院实验动物中心；CP90WX超速离心机购于自日本日立公司；荧光显微镜购自OLYMPUS；辣根过氧化物酶（HRP）和牛血清白蛋白（BSA）购自Sigma公司；胎牛血清购自北京元亨圣马生物技术研究所；RPMI1640和DMEM培养基购自Gibco公司；mAb亚型鉴定试剂盒、FITC标记山羊抗小鼠IgG抗体购自Southern biotech公司；BCA微量蛋白定量试剂盒、FITC标记山羊抗小鼠IgG抗体购自Thermo Fisher Scientific公司；……