李正平 翟高杰（青海省第四人民医院泌尿外科，西宁810000）

前列腺癌是中老年男性常见的恶性肿瘤，全球 范围内前列腺癌在中老年男性恶性肿瘤中发病率位居第二位，死亡率高居第五位。前列腺癌早期症状不明显，患者多不知情，一经发现，多数已产生骨转移［1-3］。miRNA在细胞恶性转化过程中发挥重要作用，是潜在的肿瘤标志物［4］。miR-299-5p在非小细胞肺癌等多种恶性肿瘤中低表达，发挥抑癌基因作用，但其在前列腺癌中表达研究较少［5-7］。因此本研究通过探讨miR-299-5p在前列腺癌中的表达情况并分析其对前列腺癌细胞生物学行为的影响，以期为前列腺癌靶向治疗提供新的依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 组织标本与细胞 收集2016年8月至2018年10月期间本院泌尿外科手术后存档的前列腺癌组织及对应的癌旁组织标本各42例，年龄48～75岁，平均年龄（64.5±5.8）岁。所有患者资料完整，且经过病理证实，所选样本立体后即刻放入液氮罐中保存，样本采集均经患者及直系家属同意。其中预后良好51例，为治疗后临床症状缓解、病灶无进展的患者，预后不良25例，为治疗后临床症状为缓解或病灶有进展患者。人前列腺癌PC-3细胞（CL-0185）购自武汉普诺赛生命科技有限公司。本研究经医学伦理委员会批准。

1.1.2 主要试剂与仪器 10%胎牛血清、RP⁃MI1640培养基、胰酶购自美国Gibco公司；TRIzol抽提试剂、RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒、BCA试剂盒购自BioRad公司；Lipofectamine 2000转染试剂（11668019）购自美国Invitrogen公司；miR-299-5p mimics、miR-299-5p NC购自南京锐真生物技术有限公司；CCK-8试剂盒（GK10001）购自美国GLPBIO公司；Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒（40302ES20）购自上海翊圣生物科技有限公司；……