赖 晶，史中飞，宋平顺，王子夏，倪 琳，滕宝霞

(甘肃省药品检验研究院，甘肃 兰州 730013)

在2020 年版《中国药典》（一部）中规定柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.和狭叶柴胡B.scorzonerifolium Wild.的干燥根，根据性状不同，前者习称“北柴胡”，后者习称“南柴胡”[1]。柴胡作为大宗中药材，有疏肝、升阳的功能，有保肝、解热、抗肿瘤等药效。根据《中国植物志》记载，我国柴胡属有36 种，17 变种，7 变型[2]。柴胡属植物不仅种类较多，分布广泛，不同产地均有作为柴胡药用的习性，而且性状特征较为相似，使得采集和使用时难以鉴别，以致出现混伪品与正品柴胡的混用现象。藏柴胡作为柴胡属变种之一，其来源于伞形科植物窄竹叶柴胡Bupleurum marginatum Wall. ex DC. var.stenophyllum（Wolf）Shan et Y. Li 的干燥根，主产于云南、四川、贵州、西藏等部分地区[3]。藏柴胡价格低，常作为北柴胡掺伪药材之一，因此建立快速、稳定鉴别藏柴胡的方法尤为重要。DNA 分子指纹图谱作为中药材鉴别的方法之一，具有微观或化学成分所无法达到的特异性。本实验基于ITS 通用引物对样品进行测序，用DNAMAN 软件对测序序列及NCBI 中部分序列进行比对，根据藏柴胡的SNP 位点设计鉴别引物并对特异性PCR 反应条件进行优化，从而建立一种快速、稳定鉴别北柴胡中掺伪藏柴胡的分子生物学检测方法。

1 材料与方法

1.1 仪器

VeritiTM 96-Well 型PCR 仪、Legend Micro 21R型高速冷冻离心机、Nano Drop2000 型微量核酸定量仪（美国赛默飞世尔科技公司）；Sub Cell® GT 型电泳仪（美国伯乐公司）；Geldoc-It2 315 型凝胶成像系统（美国UVP 公司）。

1.2 药材与试剂

柴 胡 标 准 药 材（ 北 柴 胡， 批 号：120992-201509）购于中国食品药品检定研究院。收集15 份样品（北柴胡10 份、藏柴胡5 份），经甘肃省药品检验研究院宋平顺检验师鉴定。……