魏建行，梁 荃，黄仕琼，李利华

（大理大学第一附属医院老年病科，云南大理 671000）

血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）是动脉血管膜的主要细胞成分，通过收缩和舒张血管调节血管张力和直径从而调节血压〔1〕。VSMC的增殖及迁移能力增加，氧化应激水平增加等均在动脉硬化的发生、发展中发挥着重要的作用。VSMC具有很强的可塑性，能够对应激信号进行应答及表型调节。VSMC的表型调节通常是由炎症和损伤触发，如细胞因子和生长因子可以诱导VSMC增殖和迁移，这些因子包括血小板源生长因子、转化生长因子和肿瘤坏死因子等〔2〕。高血压、动脉粥样硬化及血管成形术后再狭窄等都与血管平滑肌细胞表型调节有关，主要表现为从收缩型到分泌型的转变以及增殖和迁移能力增加等〔3〕。

Klotho是重要的抗衰老蛋白，随着年龄增加表达减少，从而可能在动脉硬化以及高血压、冠心病等发病中起重要作用〔4〕。已有研究表明，Klotho通过抑制胰岛素∕类胰岛素生长因子-1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）和转化生长因子-β1（trans⁃forming growth factor-β1，TGF-β1）信号通路参与氧化应激、炎症和纤维化的调节〔5〕。然而，国内外对于Klotho表达减少参与动脉硬化的具体机制尚不清楚。本研究用慢病毒干扰Klotho在人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell，HA-VSMC）中的表达，旨在探讨Klotho低表达对HA-VSMC的增殖、迁移以及氧化应激的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料 HA-VSMC（北纳生物，批号：BNCC338715）；慢病毒（上海吉玛基因）；PCR引物（上海生工生物工程）；Klotho抗体（Abcam公司，批号：EPR6856）；CCK-8试剂盒（美仑生物，批号：MA0218-500T）；Transwell嵌套小室（Corning公司，批号：3422）；超氧化物歧化酶（SOD，南京建成生物工程研究所，批号：A001-3-2）；……