汪顺，单聪，朱华贺，谭波，李小茜，杨爱东

1.上海中医药大学基础医学院，上海 201203；2.上海中医药大学附属曙光医院，上海 201203

肠黏膜在防止病原体、毒素和过敏原从外部进入组织起着至关重要的作用。研究表明，脂多糖（LPS）诱导仔猪肠损伤模型中肠黏膜屏障功能被破坏，继而引起促炎因子升高和炎症级联反应，导致肠黏膜损伤加重[1]。因此，改善肠组织损伤是避免炎症反应级联扩大的关键途径。大黄有清热泻火、凉血解毒功效。现代药理研究表明，大黄具有抗炎、抗肿瘤等作用[2]，且可通过抑制炎症因子释放，改善大鼠肠源性脓毒症[3]。mTOR信号通路主要调节机体的生长和代谢，在自噬调节中发挥重要作用[4]。研究发现，激活mTOR信号通路可改善大鼠肠缺血再灌注引起的肠组织损伤[5]。本课题组前期研究表明，大黄可下调mTOR下游p70S6K和eIF4E mRNA的表达从而减少白细胞介素（IL）-6和IL-1β的释放[6]，但是否与mTOR上游PTEN/PI3K/Akt信号通路有关还有待研究。基于此，本实验通过建立LPS诱导大鼠肠组织损伤模型，观察大黄对模型大鼠PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响，探讨其作用机制。

1 实验材料

1.1 动物

清洁级Wistar雄性大鼠30只，体质量（200±20）g，购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物许可证号SCXY（沪）2018-0006。饲养于上海中医药大学动物中心SPF级动物房。本实验经上海中医药大学动物伦理会审查批准（PZSHUTCM19012502）。

1.2 药物

生大黄27 g，饮片购自上海中医药大学附属曙光医院，批号170401，常规煎制；LPS，来源于大肠杆菌O55：B5，Sigma公司，批号057M4013V；地塞米松片，上海信谊药厂有限公司，批号015190213。

1.3 主要试剂与仪器

PTEN兔抗鼠单克隆抗体（货号9188）、Akt兔抗鼠多克隆抗体（货号4691）、β-actin兔抗鼠单克隆抗体（货号3700），美国CST公司；……