基于RNA-seq转录组学分析一贯煎对 酒精性脂肪性肝病小鼠TGFBR2受体表达的影响
2021-05-20邱丰俊李杜朱一唯闫晓风王晓玲胡旭东
邱丰俊,李杜,朱一唯,闫晓风,叶䁎杰,王晓玲,胡旭东
上海中医药大学基础医学院,上海 201203
酒精性脂肪性肝病(alcoholic fatty liver disease,AFLD)是长期过量饮酒而导致肝脏的早期病变,主要以肝脏中脂质沉积为特征[1]。酒精已成为慢性肝病的主要因素之一[2]。Ohashi等[3]发现,约90%酗酒者会发展为AFLD,并进一步发展成酒精性肝炎、肝纤维化,甚至肝硬化等。因此,防治AFLD对遏制肝脏不可逆损伤从而截断酒精性肝病进程有重要意义。一贯煎是养肝阴、疏肝气中医经典方剂,对酒精性肝病患者有良好的降脂和保肝作用[4],但一贯煎治疗AFLD的具体分子机制尚未阐明。因此,本研究通过AFLD小鼠模型和细胞模型,探讨一贯煎防治AFLD的潜在信号通路。
1 实验材料
1.1 动物和饲料
C57BL/6雌性小鼠24只,8周龄,体质量18~22 g,购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司,动物生产许可证号SCXK(沪)2018-0006,动物使用许可证号SYXK(沪)2014-0008。饲养于上海中医药大学实验动物中心SPF级饲养室,动物伦理审查编号PZSHUTCM190712014。Lieber-DeCarli液体饲料(TP4030C、TP4030D),购于江苏南通特洛菲饲料科技有限公司。
1.2 细胞和药物
AML12小鼠肝细胞株(ATCC编号CRL-2254),购于中国科学院细胞库。一贯煎(生地黄18 g,北沙参10 g,麦冬10 g,当归10 g,枸杞子12 g,川楝子4.5 g),饮片购自上海康桥中药饮片有限公司,按原方比例和制法由上海中医药大学附属曙光医院国家中医药管理局中药制剂中心制成流浸膏,再由上海中医药大学中药学院制成干粉(批号20180515),冷藏保存,每克干粉含原药材2.196 g。
1.3 主要试剂与仪器
无水乙醇(沪式10009218AR)、二甲基亚砜(沪式30072418AR),国药集团化学试剂有限公司;胰酶(货号25200-072)、DMEM/F12培养基(货号12400-024)、胰岛素-转铁蛋白-硒(货号41400-045),Thermo Fisher Scientific公司;……
