郭爱鑫，杨丽雅，周晓光，何佳璘，郭一鸣，王慧萍*，宋黎明*

(1.北京协和医学院研究生院，北京 100730；2.国家卫生健康委科学技术研究所，北京 100081；3.首都医科大学附属北京朝阳医院，北京 100020)

前列腺癌(prostate cancer)是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤，发病率高居第2位，仅次于肺癌[1-2]。近20年来随着人口老龄化及生活条件的改善，我国前列腺癌发病率也逐年增加[3]。前列腺癌确诊时多为晚期[4]，临床应用去势疗法后易产生耐药而转化为去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer，CRPC)，患者的生存期大大缩短[5]。有证据表明缺氧是许多实体肿瘤微环境改变的主要特征，肿瘤局部缺氧是造成其转移的重要因素之一[6-9]。因此，本研究通过检测缺氧微环境对人源雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和人源雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP增殖、转移、侵袭变化的影响，以期深入了解缺氧微环境对前列腺癌恶性生长作用的相关机制，为临床诊疗及相关研究提供思路。

材料与方法

一、研究材料

1.实验细胞来源：人源雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3(编号：3111C0001CCC000115)和人源雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP(编号：3111C0001CCC000040)均购自中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心，本实验室常规传代培养、冻存。

2.主要试剂：兔抗人E钙粘蛋白(E-cadherin)单克隆抗体(3195T)、兔抗人波形蛋白(Vimentin)单克隆抗体(5741T)购自美国CST公司，E-cadherin、Vimentin正反引物购自华大基因，BCA蛋白浓度试剂盒、凝胶试剂盒及结晶紫染色液购自北京索莱宝公司，cDNA第一链合成试剂盒和SuperReal 荧光定量预混试剂购自天根公司，Transwell小室和Matrigal基质胶购自美国康宁公司，Trizol裂解液购自美国Invitrogen公司。……