七氟醚后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用研究①
2021-05-19李泳洁马海平吴建江
李泳洁,马海平,吴建江,杨 龙,郭 海,王 江
(新疆医科大学第一附属医院麻醉科,乌鲁木齐830054)
心肌缺血/再灌注损伤(Ischemia/reperfusion injure,I/RI)是临床常见的病理生理过程,也是患者围术期心脏不良事件发生和死亡的重要原因[1]。七氟醚后处理(Sevoflurane postconditionning,SPostC)已被证实可通过抑制细胞凋亡、减少活性氧(ROS)的生成、增加腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)的含量和减少乳酸脱氢酶(LDH)含量,对心肌所发生的I/RI发挥良好的心肌保护作用,是极具希望的抗心肌损伤的治疗手段[2],但其具体作用机制尚不明确。前期研究表明,缺 氧 诱 导 因 子-1α(Hypoxia-inducible factors-1α,HIF-1α)作为调控心肌低氧坏境下启动内源性保护机制的始动因子,是介导SPostC发挥心脏保护作用的关键靶点[3-4]。Jankauskas等[5]研究报道,巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)作为HIF-1α的下游因子,在心肌I/RI过程中同样发挥重要的作用。在心肌组织中HIF-1α和MIF的表达水平有密切的相关性,MIF的表达随着HIF-1α表达上调而增加[6]。但是HIF-1α/MIF信号轴在SPostC减轻心肌I/RI中发挥的具体作用尚不清楚。本研究通过建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,探讨HIF-1α/MIF信号轴在SPostC对抗心肌细胞H/R损伤中的作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞、试剂和仪器 大鼠心肌细胞(H9C2)细胞株(武汉普诺赛,中国);缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抗体(Abcam,美国),巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抗体(Abcam,美国),腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)抗体(CST,美国),磷酸化AMPKα(p-AMPKα)抗体(CST,美国),山羊抗兔IgG(Abcam,美国),山羊抗小鼠IgG(Abcam,美国),β-Actin(义翘神州,中国);HIF-1α抑制剂YC-1(Selleck,美国);三磷酸腺苷(ATP)试剂盒(南京建成,中国),乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(南京建成,中国),活性氧(ROS)试剂盒(南京建成,中国);细胞培养箱MIC1-101(Billupsrothenberg,美国)……p>
