张 宁，余 波，石俊松，吴 霄，吴珍芳，李紫聪

(1 华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心，广东 广州 510642； 2 广东温氏种猪科技有限公司，广东 云浮 527400)

1962年世界上第1例体细胞克隆动物诞生[1]，1962年英国发育生物学家Gurdon利用蟾蜍幼体的肠上皮细胞作为供体细胞进行体细胞核移植，最终发育成为了蝌蚪。但是总体而言克隆技术发展较为缓慢,直到世界上第1例体细胞克隆哺乳动物Dolly羊的诞生[2]，体细胞克隆技术得到快速的发展，体细胞克隆技术相继在奶牛[3]、小鼠[4]、山羊[5]、猪[6]、狗[7]、水牛[8]、骆驼[9]、猴[10]等动物上获得成功。与此同时动物体细胞克隆技术在保存和复制扩繁优秀生产性状的农业动物、保存或恢复濒危甚至是已灭绝的动物、作为异种器官移植的供体动物以及治疗性克隆、转基因生物反应器生产药物蛋白和人类疾病模型的构建中拥有着广泛的作用。

虽然克隆技术在很多领域上都有着广泛的应用，但是就目前来说克隆技术的发展依然非常的缓慢，其中最主要的原因是克隆效率的限制。以猪为例，猪的克隆效率普遍只有1%～3%[11]。导致克隆效率低的原因主要有供体核表观遗传修饰的异常以及动物体细胞克隆中各种复杂的试验技术。表观遗传修饰主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、基因组印记、X染色体失活[12-13]。其中DNA甲基化在众多基因组的表观遗传修饰中是极为重要的[14]。DNA甲基化的异常会导致很多功能基因的异常表达，尤其是印迹基因(XIST、H19)的异常表达将会导致克隆胚胎的异常发育[15]。……