牛蒡苷元对血小板体外聚集作用的影响及机制*
2021-05-18潘彩燕张蓉林晓坚袁兆伟刘刚谢娟
潘彩燕,张蓉,林晓坚,袁兆伟,刘刚,谢娟
(1.贵州医科大学 基础医学院 药理学教研室,贵州 贵阳 550025;2.贵州医科大学 药学院,贵州 贵阳 550025;3.贵州省人民医院 药剂科,贵州 贵阳 550002)
牛蒡苷元(Arc-G)是中草药牛蒡子中的有效活性成分之一[1]。近年来,越来越多的实验证实了Arc-G对心血管类疾病具有预防和治疗作用,有研究发现其具有降血压与保护作用[2-3]、抗心律失常[4-5]、抗糖尿病[6-7]、抑制血管生长因子(PAF)诱导的血小板聚集[8]等药理作用,但关于其对凝血酶、胶原、二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集作用的影响未见报道。本文通过比浊法,观察Arc-G对不同激动剂诱导的血小板聚集作用的影响;通过ELISA(酶联免疫吸附测定法)实验方法测定cAMP(环磷酸腺苷)、TXB2(血栓素B2)含量的变化,为进一步阐明Arc-G的药理作用及防治血栓性疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1实验动物 SPF级昆明种小鼠50只,雌雄各半,体质量为18~22 g,将小鼠饲养于18~25 ℃环境下,提供充足的食物和饮用水,适应性喂养两周后进行实验。小鼠由贵州医科大学实验动物中心提供,实验动物合格证号SCXK(黔)2018-0001。
1.1.2药物与试剂 牛蒡苷元(麦克林试剂公司,批号18092808),凝血酶(Sigma公司, 批号SLBV2136),ADP(Sigma公司, 批号SLBL1267V),胶原(Chrono-log公司,批号3483),cAMP、TXB2ELISA试剂盒(江莱生物有限公司, 批号201903)
1.1.3实验仪器 高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司),全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司),聚集仪(Chrono-log公司)
1.2 方法
1.2.1制备洗涤血小板[9]小鼠下腔静脉取血,ACD抗凝(1 ∶9),等体积加入1×台式液稀释,800 r/min离心20 min,吸取上层富含血小板液体,加入适量1×台式……
