刘红雪 韩 笑 张慕玲

南京医科大学附属淮安第一医院(223300)

妊娠期糖尿病(GDM)是常见妊娠并发症，但具体发病机制尚未明确[1]。微小型RNA(miRNA)广泛存在于真核生物中的非编码RNA，与靶基因mRNA序列特异性结合后，抑制靶基因的翻译或降解mRNA，参与细胞增殖、分化和凋亡等过程[2]。目前研究表明许多miRNA在GDM发生发展过程中发挥着不可忽视的作用[3-5]。Villard[4]等发现miR-197在Ⅱ型糖尿病低表达，但未见有证实miR-197作用的报道。本研究检测GDM患者血浆中miR-197的表达，并分析与血糖相关指标的相关性及其在GDM诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2019年1—6月在本院就诊的孕26周GDM患者84例、糖耐量正常孕妇84例和糖耐量异常孕妇50例。所有孕妇均为单胎初产妇、均排除妊娠前糖尿病，无肝、肾、高血压等疾病病史。本研究经本院医院伦理委员会批准，所有孕妇均签署知情同意书。

1.2 miR-197水平测定

孕妇禁食12h后采集10 ml静脉血离心，按照Trizol(美国Invitrogen公司)提取RNA，再按照One Step RT-qPCR Kit(上海生工生物工程股份有限公司)检测miR-197表达，以U6基因为内参。miR-197正向引物：5’-CCGACACGGCCATCTCTCC-3’，反向引物：5’-GGCCATGCTGGGTGGAGAAG-3’。U6正向引物：5’-CTCGCTTCGGCAGCACA-3’，反向引物：5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’。以待测miR-197与内参U6之间闭值循环数(Ct)之差(△Ct)表示相对表达量。

1.3 血糖和血清胰岛素水平测定

采用放射免疫法及葡萄糖氧化酶法检测各组空腹胰岛素(FINS)，其中血清胰岛素检测采用放射免疫试剂盒购自上海放射免疫分析技术研究公司；葡萄糖氧化酶法检测各组空腹葡萄糖(FPG)，测定试剂盒购自上海荣盛生物技术有限公司。应用稳态模型法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR) =[FPG(mmol/L)×FINS(mIU/L)]/22.5。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0数据分析。……