尹 燕 金志春 杨雅琴 唐 娜 李 卉

1 湖北省妇幼保健院(武汉，430070)，2 湖北中医药大学

卵巢储备功能下降(DOR)早期预防，避免卵巢功能进一步衰退临床意义重大。目前预防DOR仅限于激素替代疗法，疗效有限。中医认为本病的发生多与肾虚有关，并涉及冲任气血虚滞。前期临床观察表明，补肾活血中药具有整体调控优势，能显著改善生殖内分泌和免疫系统等功能[1]。本研究从中医“精血互生”角度出发，通过观察补肾益气和血方对DOR模型大鼠卵巢血管生成和血清性激素的影响，探讨其干预DOR的作用与机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

采用SPF级性成熟SD雌性大鼠，12周龄，健康，雌性，体重250～280g，由武汉华联科生物技术有限公司提供[许可证号SCXK(鄂)2015-0018，合格证编号42000600029456]。

1.2 实验仪器及试剂

MD1000型正置显微镜和RM2235型石蜡切片机(徕卡显微系统有限公司)；酶标仪(Labsystems Multiskan MS，芬兰)；普通PCR 仪(杭州柏恒科技有限公司)；荧光定量 PCR 仪(Bio-Rad，美国)；凝胶成像系统(北京君意东方电泳设备有限公司)。酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(武汉贝茵莱生物技术有限公司)。兔抗鼠VEGF多克隆抗体(abcam公司)；Trizol总RNA提取试剂盒购(ambion公司)。PCR引物(武汉擎科创新生物科技有限公司)。SYBR Green PCR 试剂盒(KAPA Biosystems 公司)。

1.3 实验药品

雷公藤多苷片10mg /片(湖南协力药业有限公司)；戊酸雌二醇片1mg/片(拜耳医药有限公司)；中药(补肾益气和血方：熟地 15g，菟丝子 15g，补骨脂 10g，龟板胶 15g，鹿角胶 15g ，山茱萸 15g，山药 15g，枸杞 10g，当归 10g，白芍 10g，川芎 12g，益母草10g，党参 15g黄芪 15g)免煎颗粒剂(华润三九医药股份有限公司)用纯净水配制成低、中、高 3 个浓度混悬药液，4 ℃保存备用。……