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一种油菜及其近缘植物干种子基因组DNA提取方法

2021-05-15

河西学院学报 2021年2期
关键词:植物方法

范 惠 玲 白 生 文 侯 丽 娟

(1.河西学院农业与生态工程学院;2.河西学院生命科学与工程学院,甘肃 张掖 734000)

高丰度、高纯度DNA 分离提取往往是对农业上许多重要性状进行遗传分析的限制因素.干燥种子由于DNA 与组蛋白等紧密结合,导致提取高质量、高丰度DNA 具有一定的难度.从含有大量蛋白质、多糖类物质的干种子中,分离出高质量DNA 的难度则更大[1].DNA样中混杂的酚类、色素、多糖和蛋白质等还会干扰一些生物酶的活性,如DNA 聚合酶、连接酶和限制性核酸内切酶等,进而干扰后续实验的进行[2].解决这类问题的关键则是在DNA提取过程中有效去除蛋白质、多糖、色素等杂质.基于这一问题的出现,目前关于从种子中提取DNA的大量实验方法见诸报端,如Chunwongse等[3]发明了从水稻和小麦中用半粒种子提取DNA的方法;Mcdonald 等[4]和Kang等[5]发明了从棉花、花生、大豆等作物种子中提取DNA的方法;国内也有很多学者相继发明了一些从种子中提取DNA的方法[6-13].尽管这些方法在不同的植物种子上都取得了较好的提取效果,但对于油菜及其近缘植物干种子DNA的提取存在或多或少的不足.至今,关于油菜及其近缘植物干种子DNA提取的文献报道较少.谢景梅等[14]以黑籽和黄籽甘蓝型油菜为材料,用改良的CTAB 法提取了基因组DNA,DNA 样品液A260/A280的值介于1.47~1.66 之间,低于1.8,表明DNA样品的纯度并不理想.丹巴等[15]用SDS法和CTAB法提取了西藏黄籽油菜干种子的DNA,所提DNA样品液适用于SSR分析,但只用了甘蓝型油菜,未涉及其它两种类型油菜乃……

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