(山东医学高等专科学校，山东 临沂 276000)

据美国癌症协会统计，乳腺癌(Breast cancer)是当前女性发病率最高的恶性肿瘤，占女性全部恶性肿瘤的30%[1]，且年轻化趋势逐年递增[2]。近几年，乳腺癌的综合治疗已取得了突破，但其侵袭性及术后复发率仍然较高。因此，研究乳腺癌的发病机制以及可能的治疗靶点具有重要意义。

Nodal是转化生长因子β(TGF-β)超家族成员之一，其作为胚胎形成的重要调节因子，参与了中胚层与内胚层之间的形成，前-后体轴位置的确定及左-右体轴的特化等一系列关键性事件[3]。在Nodal信号通路中，Nodal被分泌至胞外，与受体结合形成复合物，磷酸化后激活细胞内Smad2和Smad3蛋白，Smad2/3复合物再与Smad4结合形成具有活性的三聚体转运至细胞核内，与一些转录因子、辅激活物或辅阻遏物结合，来调控靶基因的转录，参与细胞的生长与分化过程。研究发现[4]，Nodal在肿瘤细胞表型转变过程中发挥作用，Nodal蛋白在恶性肿瘤如黑色素瘤、乳腺癌、子宫内膜癌和前列腺癌中表达显著增加，且与肿瘤的恶性程度密切相关[5-8]。因此，本研究通过检测Nodal蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的表达情况，分析它与乳腺癌临床病理特征的关系，探讨Nodal蛋白在乳腺癌的发生与发展过程中可能的作用。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集乳腺浸润性导管癌患者组织95例和癌旁组织40例，均为女性，年龄25～85岁，中位年龄58岁。组织学分级：Ⅰ级8例，Ⅱ级54例，Ⅲ级33例；淋巴结转移44例，未转移51例。所有病例均为首发病例，术前均未行放化疗、靶向治疗及其他的抗肿瘤治疗。

1.2方法

1.2.1免疫组织化学 将组织的蜡块制成4μm的连续性切片，进行免疫组织化学染色。具体步骤如下：将待检组织蜡块制成石蜡切片，将组织切片置于60℃恒温箱内过夜，脱蜡、水化，灭活，抗原修复，蒸馏水水洗，滴加一抗工作液，滴加聚合物增强剂(试剂A)，加酶标抗鼠/兔聚合物(试剂 B)，DAB显色-苏木素复染，盐酸分化，氨水返蓝，浸入86%、95%、100%梯度酒精中脱水，二甲苯I、Ⅱ、Ⅲ中各透明，干燥后中性树胶封片，光学显微镜下观察实验结果。本实验用PBS溶液代替一抗做阴性对照，用已知的阳性组织切片做阳性对照。

1.2.2染色结果判断 由两位病理医生独立判读Nodal的表达情况。Nodal蛋白阳性染色定位于细胞膜或细胞质中。

2 结果

82.1%(78/95)的乳腺癌和12.5%(5/40)的癌旁组织中Nodal蛋白阳性表达。统计分析结果显示，Nodal蛋白的表达与肿瘤大小、淋巴结转移及组织学分级之间显著相关。见表1。

表1 Nodal蛋白在乳腺癌中的表达与临床病理特征的关系

3 讨论

肿瘤细胞在恶性转化的过程中，高侵袭性的肿瘤细胞和胚胎期的原始细胞有很多共性。具有胚胎前体细胞特性的恶性肿瘤细胞可通过自身的分子标志物使其具有去分化、多分化潜能的特性，乳腺癌也不例外。目前，随着早期诊断、放疗与化疗、内分泌治疗和分子靶向治疗等手段的应用，使乳腺癌患者的死亡率呈现了下降趋势，但乳腺癌的侵袭性、远处转移及患者术后复发仍是困扰临床医生的难题。

Nodal的表达仅限于胚胎组织，人类胚胎干细胞及肿瘤细胞，特别是在分化程度较低且恶性程度高的肿瘤细胞中[9]。这表明Nodal除了在早期祖细胞和生殖细胞表达外，在肿瘤的形成过程中也会表达。研究表明[5-8]，Nodal在恶性肿瘤如黑色素瘤、乳腺癌、子宫内膜癌和前列腺癌中表达显著增加，并且与肿瘤的恶性程度密切相关。周慧俊等[10]研究发现，在胃腺癌中Nodal的表达与血管浸润和淋巴结转移密切相关。本实验分析了Nodal的表达与乳腺癌临床病理特征的关系中发现，Nodal的表达与ER、PR、HER2的表达和增殖指数Ki67之间的比较无统计学意义，而与肿瘤大小、淋巴结转移及组织学分级之间的比较有统计学意义。推测Nodal可能在促进乳腺癌的恶性发展过程中发挥作用。

综上所述，Nodal蛋白在乳腺癌中的表达显著升高，可能在促进乳腺癌的发生与发展过程中发挥作用。通过研究Nodal蛋白在乳腺癌发生与发展过程中的作用，为乳腺癌的早期诊断、治疗提供新的思路和靶点。