广西黑衣壮儿童VDR基因rs1544410、rs7975232位点多态性研究

2021-05-13陆壮念林娜梁立婷杨丽娟

右江民族医学院学报 2021年2期

陆壮念，林娜，梁立婷，杨丽娟

(1. 右江民族医学院附属医院儿科，广西百色 533000；2. 右江民族医学院研究生学院，广西百色 533000)

维生素D受体(Vitamin D receptors，VDR)基因定位于人染色体12q13上，能够编码亲核蛋白，从而介导1，25(OH)2D3在人体生理学过程中发挥生物效应[1]。研究发现[2]，VDR基因突变与遗传学疾病的发生有关。VDR基因中单个碱基突变虽然不明确引起遗传病，但在人群中有一定分布频率成为单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism，SNP)[3]。这种SNP多态性可稳定遗传，从而引起子代多种疾病发生发展。目前国内外研究报道共有22个点突变能够导致VDR基因功能的缺失[4-5]。rs1544410、rs7975232位点的基因型和等位基因频率在不同地区、不同种族之间差异报道结论不一，而在广西黑衣壮儿童中分布研究尚未见报道。本次研究通过选取115例广西黑衣壮儿童为研究对象，分析其VDR基因rs1544410、rs7975232位点基因型和等位基因分布及特点，比较与其他地区不同种族人群差异情况，为后续研究VDR在不同地区种族人群中与各种疾病相关性和致病因素研究提供科学理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2018年5月—2019年5月在我院儿童保健康复科体检健康儿童为研究对象。纳入标准：①年龄<14岁；②临床指标、发育指标正常；③儿童祖辈三代均为广西黑衣壮；④儿童本人和(或)监护人知情同意并自愿参与研究。最后纳入115名，男童66名，女童49名，年龄3～12岁。本次研究经过我院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 DNA提取采取所有研究对象外周静脉血2 ml，置于EDTA抗凝管中，3500 r/min，15 min离心取上层血清。采用离心柱型血液基因组DNA 提取试剂盒提取DNA，操作步骤详见说明书，置入-80℃保存待测。

1.2.2 引物设计通过primer3在线软件(http：//primer3.ut.ee/)设计引物，委托捷瑞生物工程(上海)股份有限公司合成。扩增rs1544410 位点和rs7975232位点的引物见表1。