宋嗣恩，覃月秋，黄赞松，周喜汉

(1. 右江民族医学院研究生学院，广西 百色 533000；2.右江民族医学院附属医院消化内科，广西 百色 533000)

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是消化内科常见的急危重症，约占急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)20%，该病起病凶险、并发症多、治疗费用高、预后差、病死率高[1-2]。临床上SAP的早期表现为全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，晚期常因继发感染导致多器官功能障碍(multiple organ dysfunction，MODS)。有研究发现淋巴细胞凋亡异常导致机体免疫失衡是SAP患者继发感染及脓毒症的重要原因[3]，但其分子机制尚不清楚。最近研究发现肌醇需求酶1(inositol requiring enzyme 1，IRE1)参与了细胞凋亡的调节[4]，而IRE1是否参与SAP淋巴细胞凋亡的调节文献报道较少。为明确IRE1在大鼠SAP淋巴细胞凋亡中的作用，本研究应用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导SD大鼠SAP动物模型，RT-qPCR检测脾脏淋巴细胞IRE1 mRNA、Caspase-3 mRNA的表达情况，流式细胞术检测淋巴细胞凋亡，初步探讨IRE1对SAP大鼠脾淋巴细胞凋亡的作用，为阐明SAP机体免疫失衡机制，寻找干预和治疗SAP新靶点，提供可靠的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 20只体重控制在250～300 g的成年SD大鼠，牛磺胆酸钠(美国Sigma)；大鼠淀粉酶和脂肪酶测定试剂盒(北京冬歌博业生物科技有限公司) ；总RNA提取试剂盒(上海闪晶分子生物科技有限公司)；Fastking RT Kit(上海闪晶分子生物科技有限公司)； SYBR Green(上海闪晶分子生物科技有限公司)；PCR引物IRE1、 Caspase-3合成(上海捷倍思基因技术有限公司)；Anti- IRE1抗体、Anti-Caspase-3抗体(默克生命科学)；紫外分光光度计；罗氏LightCycler96实时荧光定量PCR仪。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 采用随机数字表法将20只大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP组，每组10只。……