孟东雪 郭玉荣 罗斌军 周新华 傅尧 曹天雄

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因之一，其中非小细胞肺癌（non⁃small cell lung cancer，NSCLC）约占肺癌的 80%［1⁃3］。目前，尽管 NSCLC 的治疗取得了很大进展，但患者的临床生存率仍然很低［4］。因此，寻找有效的治疗药物及靶点迫在眉睫。

传统中药用于治疗恶性肿瘤历史悠久，也是化学抗癌药物和多种化疗药物的重要来源［5⁃6］。扶正抑瘤汤是由三棱（10 g）、莪术（15 g）、龙葵（15 g）、白英（10 g）、半枝莲（30 g）、白花蛇舌草（30 g）、黄芪（9 g）、当归（30 g）、茯苓（30 g）、白术（10 g）等10种中草药按一定比例混合而成的经典方剂［7］。目前研究表明扶正抑瘤汤能抑制前列腺癌、肝癌生长［8⁃9］。然而，扶正抑瘤汤对NSCLC的影响及其机制尚不清楚。越来越多证据表明，凋亡通路失调可促进肿瘤发生［10⁃11］。PI3K/Akt/mTOR信号通路参与NSCLC细胞凋亡过程［12］，失活的 PI3K/Akt/mTOR信号通路可以抑制NSCLC细胞存活，诱导细胞自噬和凋亡［13］。细胞凋亡是一种程序性细胞死亡，涉及许多生理和病理过程，有助于维护基因组完整性［14］。本研究探讨扶正抑瘤汤对人肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其是否通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响NSCLC的生物学行为，旨在为扶正抑瘤汤治疗NSCLC提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料与试剂

人肺腺癌细胞株A549购自中国上海生物化学和细胞生物学研究所；扶正抑瘤汤中药购自桂林市中西医结合医院药房；CCK⁃8试剂盒购自默沙克有限公司；胎牛血清购自 Gibco公司；一抗 Beclin⁃1、LC3B、P62、PI3K、p⁃PI3K、Akt、p⁃Akt、mTOR以及p⁃mTOR均购自英国Abcam（上海）公司；β⁃actin购自美国Santa Cruz公司；山羊抗小鼠和山羊抗兔IgG（H+L）购自英国Abcam（上海）公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自上海碧云天公司；……