李素素，常 艳，魏 伟

(安徽医科大学临床药理研究所，抗炎免疫药物教育部重点实验室，抗炎免疫药物安徽省协同创新中心，安徽 合肥 230032)

色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase，TDO2)是犬尿氨酸代谢通路(kynurenine pathway，KP)的初始限速酶之一，能够催化色氨酸(tryptophan，Trp)代谢为犬尿氨酸(kynurenine，Kyn)和其他活性代谢产物，包括犬尿喹啉酸、喹啉酸和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸等。TDO2首次发现于大鼠肝脏，受糖皮质激素及L-Trp的诱导。Trp是TDO2的唯一底物，TDO2具有分解代谢Trp的高度特异性。TDO由TDO2基因编码，具有4个亚基[1]。TDO2的整体结构为同源四聚体，由406个氨基酸组成。约90%的Trp由肝脏中TDO2降解，可维持血液中Trp水平的稳定[2]。

研究表明，TDO2与神经系统疾病病理生理密切相关，如阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease，AD)、抑郁症和精神分裂症等。新近研究发现，TDO2在多种肿瘤中均有高表达，主要通过直接作用于肿瘤细胞以及间接调控免疫逃逸，促进肿瘤生长，与恶性肿瘤发生发展密切相关[4-6]。相关报道同时发现TDO2与多发性硬化症等炎症免疫相关性疾病有关，但具体作用尚不清楚[3,7-8]。因此，本课题组采用CRISPR/Cas9技术构建TDO2基因敲除(TDO2 gene knockout，TDO2-KO)小鼠模型，在蛋白水平进行了验证，并进行了初步表型研究，以期在动物水平上进一步探究TDO2基因的功能学特性以及在疾病病理机制中的作用。

1 材料

1.1 实验动物采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建TDO2-KO小鼠，本工作与南京集萃药康生物科技公司实验室合作完成。野生型(wild type，WT)小鼠(C57BL/6J)购自南京集萃药康生物科技公司，合格编号(201908136)。实验动物操作及饲养均符合安徽医科大学实验动物管理与伦理委员会相关规定。……