闫思远，任苗苗，杜 娟，李 金，杨富龙，李嘉泓，顾沛雯

(宁夏大学 农学院，宁夏 银川 750021)

内生真菌是指在其生活史中某一阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部，且被感染的宿主植物不表现出明显病害症状(至少是暂时)的一类真菌[1]。研究发现,内生真菌可促进植物生长，增强植物对生物胁迫和非生物胁迫的抗性，并且能给植物提供氮源、碳源等营养物质及一些激素[2]。目前，由于宿主植物生活环境的多样性以及内生真菌与宿主植物关系的复杂性，有关内生真菌在植物体内生命活动的研究仍处于探索阶段，对内生真菌与宿主植物间的营养代谢关系尚无定论[3]。解决以上问题的关键在于建立内生真菌遗传标记体系，并用于其在宿主植物中侵染定殖规律和内生机制研究。

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)作为一种新型报告蛋白，因荧光性能稳定，表达与受体细胞种属无关且检测方便，目前在研究真菌与宿主相互作用中应用广泛[4]。Yao等[5]利用GFP标记揭示了交枝顶孢(Acremoniumimplicatum)在番茄根部的内生性。赵兴丽等[6]借助GFP标记探究了钩状木霉(Trichodermahamatum)ACCC31649在辣椒植株中的定殖能力。隋丽等[7]用GFP标记研究了球孢白僵菌(Beauveriabassiana)在玉米中的定殖规律和促生长特性。

表达载体形式的基因转移是常用的外源基因转化方式[8]。外源基因在宿主细胞中的表达取决于两个因素，第一，启动子与目的菌株的匹配程度；第二，参与基因转录全过程的DNA顺式作用元件和反式作用元件的影响[9]。因此，筛选与宿主细胞相互匹配的表达载体，是促使外源基因表达的重要前提[10]。……