许 睿，钱 军，张明亮，张立功，郭晨旭，谢 强

（蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科-中德乳腺VIP病区，安徽 蚌埠 233000）

最新调查显示，乳腺癌的发病率在女性癌症中逐年上升，成为世界上最常见的癌症之一［1］。虽然近年来乳腺癌患者的总体生存和预后有所改善，但转移仍是患者死亡的首要原因。乳腺癌转移患者5年生存率仅26%，而非转移患者通过治疗后总生存率可以达到90%［2-3］。因此，确定乳腺癌转移的潜在分子机制和开发新的治疗靶点成为乳腺癌治疗的必要途径。

长链非编码RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）是一组长度超过200 个核苷酸的非编码RNA［4］。在最近的研究中证实，lncRNA 在基因表达调控方面发挥着极其重要的作用，并参与了肿瘤的形成、增殖、侵袭、转移、耐药性等［5］。LncRNA MEG3 定位于人类染色体14q32，属于DLK1-MEG3 基因座［6］。最近几年引起了人们的广泛关注，已有学者表明lncRNA MEG3可作为抑癌基因调控癌细胞的增殖和转移［7］，但在侵袭和迁移方面的机制并无具体研究。因此，本研究主要在细胞水平上通过在乳腺癌细胞系中过表达lncRNA MEG3，检测细胞迁移及侵袭能力的改变，并探讨其潜在机制。

1 材料与方法

1.1 细胞及主要试剂乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7、SKBR-3 均由中国科学院上海细胞库提供；pcDNA3.1-vector和pcDNA3.1-MEG3由上海吉凯基因公司合成；RPMI-1640 培养基及胎牛血清由美国Gibco 公 司 提 供；Lipofectamine 2000 转 染 试 剂、TRIzol®Plus RNA Purification Kit 和Revert Aid First Strand cDNA short kit 由美国Invitrogen 公司生产；Power SYBR®Green PCR Master Mix 由瑞士Roche 公司提供；兔抗人E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin 及β-actin 单克隆抗体及鼠抗兔IgG 二抗均购自英国Abcam 公司；结晶紫溶液及BCA 蛋白浓度测定试剂盒由上海碧云天公司生产；Transwell 小室购于美国Corning 公 司；matrigel 基 质胶 由 美 国Sigma 公 司 生产；……