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辣椒愈伤组织的诱导及再生体系的建立

2021-04-24李二秀钱晶晶

安徽科技学院学报 2021年6期

王 宁, 李二秀, 钱晶晶

(安徽科技学院 农学院,安徽 凤阳 233100)

辣椒(

Capsicum

annuum

L.)为茄科、辣椒属,园艺作物,其果实颜色紫色,有较好的推广空间。目前,我国辣椒种植面积较广,在四川、安徽等地广泛种植,仅次于白菜,居蔬菜作物第二位,产值和效益居蔬菜作物之首,其含丰富的Vc,风味独特。 多年来,辣椒病虫害十分严重,通过转基因来培育辣椒抗病毒品种受到了越来越多的关注。

目前,组织培养快繁技术在植物繁殖领域的应用越来越广泛,有关辣椒组织培养相关报道有很多,但存在着分化率低,培养周期长,不定芽生长能力弱,分化的芽不伸长等问题,满足不了基因工程育种所需的大量分化苗要求。本试验以MS培养基为基本培养基,通过添加不同激素,以及改变激素的比例,研究‘凤紫运1号’辣椒的愈伤组织诱导与再生体系,为后续遗传转化体系的建立,奠定研究基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料来源于安徽科技学院凤阳校区园艺组培室,以辣椒(‘凤紫运1号’)叶片作为试验材料。

1.2 培养条件

培养室温度为(25±2) ℃,光照强度为3 000 lx,光照时间为12 h/d,空气湿度为50%~60%。

1.3 试验方法

1.3.1 外植体获得 挑选辣椒‘凤紫运1号’幼嫩叶片,流水冲洗后,在超净工作台上,首先用无菌水冲洗3次,其次用75%消毒30 s,再次用无菌水冲洗1~2次,然后用质量分数0.1% HgCl消毒8 min,最后用无菌水冲洗4~6次。

1.3.2 不同浓度蔗糖对愈伤的诱导 以MS为基本培养基,加入6 g/L的琼脂,分别加入不同浓度的蔗糖(表1),加入NaOH溶液调节pH为6.0±0.2,然后放入高压灭菌锅中121 ℃,灭菌20 min。……

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