牛西强， 罗潇云， 胡能兵， 黄先忠

(安徽科技学院 农学院，安徽 凤阳 233100)

提取高质量的植物组织总RNA是进行反转录PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、转录组测序和基因克隆等分子生物学实验的基础和前提。不同于动物细胞，由于植物细胞壁中存在较多的多糖、多酚和萜类等次生代谢物质，增加了植物组织总RNA的提取难度。并且，因为不同植物或同一植物不同组织结构和次生代谢物存在差异，提取组织总RNA的方法也不尽相同。目前常用的提取植物组织总RNA方法有CTAB法、异硫氰酸胍法、SDS-酚抽提法，以及现在很多生物技术公司开发的试剂盒，如Trizol Reagent试剂和RNAprep Pure等。植物组织总RNA提取最关键的是防止降解和污染，要获得完整性好和纯度高的总RNA，植物组织破碎要迅速和充分。植物科学研究中，选择一个研究材料从事分子生物学方面研究，往往首先从RNA开始。因此需要在自己的实验室建立一套成熟的RNA分离、基因表达的体系，方可进入更深层次的研究。应根据不同植物材料的特点，选择恰当的方法提取高质量植物组织总RNA，反转录成cDNA，进行基因克隆和基因表达分析等实验内容。

辣椒(

Capsicum

annuum

L.)富含维生素C和辣椒素等多种营养物质，是一种深受人们喜爱的经济蔬菜作物。辣椒在我国的种植面积仅次于白菜。随着辣椒的广泛栽培，对优良品种的需求更高了，常规育种已不能满足需要，分子育种将成为一种必然趋势。辣椒分子育种依赖于对控制辣椒农艺性状重要功能基因的功能鉴定、功能解析、代谢调控通路的深入解析。……