★熊进挺 邓培刚 李嘉杰 任大斌 郑平 段剑 冯九庚 邹树峰 陈伟，4（.南昌大学第四附属医院神经外科 南昌 000；.上海市浦东新区人民医院神经外科 上海 099；.南昌大学第一附属医院神经外科 南昌 0008；4.同济大学附属上海东方医院神经外科 上海 000）

星形胶质细胞来源的外泌体可对受损的神经元起着保护作用［1］，但具体机制不完全明确。最新研究发现，靶细胞对外泌体的吸收与供体细胞Cx43蛋白表达呈正相关［1-2］，故笔者推测，星形胶质细胞通过外泌体对受损神经元的保护可能和Cx43蛋白有关。在本实验中，笔者通过抑制共培养模型中的星形胶质细胞的Cx43蛋白，观察神经元内的形态、功能、凋亡及外泌体相关标记蛋白的表达，以探明与星形胶质细胞通过外泌体对神经元的保护机制，为脑损伤后神经功能保护提供有益的补充，同时为寻找新的治疗靶点提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 实验所需材料如下：C57BL/6孕鼠（上海毕凯实验动物有限责任公司，沪ICP备05033115），DMEM-F12/Neurobasal/B27（Gbico,美国），实验级H2O2（Sigma,美国），Gap26（Ape X Bio，美国），3微米孔径Transwell培养皿 （Corning, 美国），RIPA细胞裂解液（Solarbio，中国），兔抗ZO-1（Abcam, 英国），兔抗α-actin（Santa Cruz，美国），小鼠抗GLT-1（Zymed，美国），兔抗Bcl-2（Abcam，英国），小鼠抗Bax（Abcam，英国），兔抗CD63（Santa Cruz，美国），小鼠抗GAPDH（Abcam，英国），辣根酶标记二抗（Abcam，英国），化学发光试剂盒（中山金桥生物科技，中国），ELFA 试剂盒（博士德生物，中国），蛋白电泳仪（Bio-Rad，美国），NAPDH氧化酶活性试剂盒（Beyotime，中国），M200Pro免疫酶标仪（TECAN，奥地利），LC-10Avp高效液相色谱仪（岛津，日本）。

1.2 原代细胞的获取及共培养细胞模型的建立

1.2.1 医学伦理审查 医学伦理审查本实验的动物伦理得到南昌大学第四附属医院、南昌大学第一附属医院及上海浦东新区人民医院实验动物伦理委员会的同意。……