漆世华，秦红刚，韩 兴，李晶梅，熊 亮，石宝兰，谢红玲

(国药集团动物保健股份有限公司，武汉 430075)

猪瘟是由猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)引起的一种高度接触性传染病，对全世界的养猪业构成巨大威胁。不同年龄、性别和品种的猪均能感染，死亡率高达80%～90%。世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病之一，我国将其列为一类动物传染病[1]。猪瘟兔化弱毒疫苗是国际上公认的、安全有效的预防猪瘟的弱毒疫苗，也是在我国应用最广泛的猪瘟疫苗。该疫苗推出至今其生产工艺经历了升级换代过程，从组织毒疫苗、原代细胞毒疫苗到传代细胞毒疫苗等[2]。目前，传代细胞苗主要采用转瓶培养工艺，每个转瓶均是独立的细胞培养单元，每瓶细胞的质量、病毒含量都有差异，导致疫苗批间差异大，而且操作劳动强度大，生产效率低，有必要尽早转型为生产规模更大、集约程度更高的生物反应器培养工艺。

1967年Wezel[3]首先应用微载体系统培养贴壁依赖性细胞，此后这一技术得到迅速发展。生物反应器微载体悬浮培养系统由于具有较大表面积、细胞产量高、培养环境便于检测和控制等优点，已应用于狂犬病、脊髓灰质炎等疫苗[4-5]的生产。本研究以ST细胞为宿主细胞，采用微载体细胞悬浮培养技术进行猪瘟抗原的培养工艺进行了研究，为进一步利用生物反应器工业化大规模生产猪瘟疫苗提供基础性数据。

1 材料和方法

1.1 细胞、病毒和培养基 ST细胞、猪瘟兔化弱毒(简称“猪瘟病毒”)为国药集团动物保健股份有限公司保存；……