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过表达RNF43抑制肾透明细胞癌细胞系786-O增殖、迁移与侵袭

2021-04-16孙志超王秀芝杨舒慧

基础医学与临床 2021年4期

孙志超,王秀芝,杨舒慧,浦 洋*

(1.中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 生理学系,北京 100005;2.中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心) 精准医学重点实验室,北京 100020)

肾癌(kidney cancer)是泌尿系统第二常见的恶性肿瘤,目前,占全球成人恶性肿瘤的5%左右,且发病率逐年上升[1]。约80%的肾癌被临床诊断为肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)[2]。大约30%的肾细胞癌患者在初诊时就有转移性病灶[3]。20%~40%的术后病例会发生局部复发[4]。此外,传统的化学药物治疗和放射治疗对肾透明细胞癌的治疗基本无效[5]。因此,迫切需要进一步理解肾透明细胞癌发展和转移的机制,以识别新的生物标志物和开发更有效的治疗肾透明细胞癌的方法。

RNF43是一种E3泛素化连接酶[6]。RNF43缺失能激活Wnt/β-catenin信号通路[6-8]。RNF43在癌发生过程中的促进或抑制作用颇受争议。RNF43在肝癌中起促进作用,而在胰腺癌、胃癌和大肠癌中起抑制作用[7,9-10]。但是RNF43对肾透明细胞癌细胞生物学功能的影响尚不清楚,其是否参与肾透明细胞癌的发生发展,以及其在临床诊断与治疗中的作用有待探究。

本研究重点探讨RNF43对肾透明细胞癌增殖、迁移和侵袭的影响,为肾透明细胞癌发生的分子机制、诊断和治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系:人肾透明细胞癌细胞系786-O(中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心)。

1.1.2 主要试剂:胰蛋白酶和胎牛血清(Gibco公司);RPMI1640培养基(Corning公司);β-actin抗体(Santa Cruz 公司);β-catenin和 Non-phospho (Active) β-catenin抗体(Cell Signaling Technology公司);DDK抗体、RNF43过表达质粒和空载质粒(OriGene公司);抗兔和鼠的荧光二抗(LI-COR公司);……

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