闫军 周高晋

复发和转移是影响乳腺癌病人预后的重要因素，其中自噬发挥重要的作用[1]。研究表明，乳腺癌组织中Beclin 1高表达，且与淋巴结转移及远处转移有关[2]。unc-51-like kinase1(ULk1)是自噬体形成的关键蛋白，ULk1蛋白阳性是乳腺癌复发的保护因素[3]。线粒体融合蛋白2(Mfn2)可调控线粒体融合、转运及线粒体自噬，抑制肿瘤细胞增殖，促进细胞凋亡[4]。研究发现，Mfn2蛋白在乳腺癌组织中低表达，与淋巴结转移及远处转移有关[5]。本研究检测了乳腺癌组织中自噬相关基因、Beclin 1、ULk1及Mfn2基因的表达与复发的关系。

对象与方法

一、对象

2013年12月～2015年6月收治的乳腺癌根治手术病人100例。均明确诊断，术前未行放化疗、内分泌治疗，临床资料完整，该研究获得医院伦理委员会批准(批号：2013-015)。排除合并其他器官肿瘤，严重精神疾病，合并严重的心肝肾疾病。病人均为女性，年龄30～74岁，中位年龄(45.34±8.23)岁；病理类型：浸润性导管癌84例，浸润性小叶癌6例，其他10例；分期：ⅡA 6例，ⅡB 52例，Ⅲ 42例；组织学分级：Ⅰ级24例、Ⅱ级36例、Ⅲ级40例；术后化疗周期：>6个72例；≤6个28例；接受内分泌治疗病人64例。病人随访5年，根据是否复发分为复发组(37例)和未复发组(63例)。37例复发病例中局部复发11例，区域复发19例，局部+区域复发7例。

二、方法

1.外周血单个核细胞(PBMC)分离：病人术前空腹抽取肘静脉血4 ml，加入同体积的淋巴细胞分离液，以300×g离心25分钟后可发现离心后管内出现细胞分层，中上层之间乳白色液面即为单个核细胞层，采用毛细吸管将该层细胞移入另一离心管，加入Hanks液清洗后保存备用。

表2 复发组及……