周蓓 王婧 李仲洋

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，严重影响女性的身心健康。尽管各种治疗方法取得一定进步，但长期生存率并不乐观。寻找到一种影响肿瘤细胞进展的靶向基因迫在眉睫。多项研究结果显示，乳腺癌组织或血清中微小 RNA(microRNAs)差异性表达，与病人的预后有关，如miR-199b-5p、miR-145等[1-2]。miR-597位于人类染色体8p23.1，研究发现其与结肠癌的发生发展有关[3]，但对乳腺癌的调控机制尚不清楚。FOS 样抗原2(Fos-related antigen 2,FOSL2)属于 AP-1 转录因子家族，在肿瘤增殖、细胞周期调节等过程中发挥重要的作用[4]。本研究观察miR-597对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响，并探讨miR-597与FOSL2的关系。

对象与方法

一、对象

2018年1月～2019年4月在我院接受手术治疗的乳腺癌病人30例，年龄38～71岁，平均年龄(60.22±8.02)岁。病理分型：浸润性导管癌22例，黏液癌6例，浸润性小叶癌2例。临床分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期10例，Ⅲ期6例。所有病人均经病理明确诊断，前3～5个月内均未进行任何抗肿瘤治疗。术中切除的癌组织及正常乳腺组织(30例，距离癌灶边缘5 cm)迅速液氮冻存以提取RNA用于qRT-PCR检测。所有标本收集均征得病人或家属同意并签署知情同意书。本研究经我院伦理委员会批准。

表1 目标引物序列和大小

二、方法

1.主要试剂、细胞株及仪器：人乳腺癌细胞系T-47D,SK-BR-3,MDA-MB-231,MCF7及 BT-474，正常乳腺细胞株MCF10A(上海生命科学研究所)。miR-597引物序列，miR-597 mimics、miR-NC对照质粒(上海生命科学研究所)；兔抗人FOSL2、β-actin多克隆一抗、鼠抗兔单克隆二抗(Sigma公司，美国)；RNA提取试剂盒，转染试剂盒(武汉博士德生物公司)；氯化丙定(propidium iodide,PI)(BDBiosciences，美国)；荧光素酶检测试剂盒(BioVision公司，美国)；……