姚晓雯，唐 巍，李梦醒，兰 崴，王 玉，高云云，金子开

(安徽中医药大学针灸推拿学院，安徽 合肥 230012)

缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)的生理病理过程属于多因素参与、多环节循环、多途径损伤的酶促级联反应。因其高发病率、高死亡率、高致残率，CIS严重威胁人类健康。既往研究显示，电针与现代康复医学联合的治疗模式通过抗炎、增强神经可塑性、促血管新生、抑制细胞凋亡等多种途径改善脑部供血，促进神经损伤修复。沉默信息调节因子1(silent information regulator 1，SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α，PGC-1α)是一条内源性的抗氧化损伤通路，SIRT1通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide，NAD)依赖的去乙酰化调控PGC-1α活性，参与氧化应激、能量代谢、细胞凋亡等多种生物学途径。本实验通过观察电针联合丰富康复训练对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型大鼠SIRT1/PGC-1α通路及相关凋亡基因[B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3，Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(cysteinyl aspartate specific proteinase-9，Caspase-9)]的影响，从氧化应激角度阐明电针联合丰富康复训练的神经保护机制。

1 材料

1.1 实验动物 选取清洁级成年健康雄性SD大鼠75只，体质量为(300±20)g，于(23±3)℃、45%～55%湿度环境下自由饮食饲养，术前禁食不禁水。本实验经安徽中医药大学实验动物伦理委员会批准，实验动物生产许可证号为SCXK(鲁)2019-0003。

1.2 试剂与仪器 荧光显微镜(BA410E)：Motic公司；石蜡切片机(TM2135)：Leica公司；激光多普勒仪(FP 50 Shift)：北廷测量技术公司；荧光定量PCR仪(PIKOREAL 96)：Thermo Scientific；丙二醛(malonic dialdehyde，MDA)(A003-1)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)(A001-1)：南京建成生物工程研究院；TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(C1088)：Beyotime公司；SIRT1(bs-0921R)：Bioss；PGC-1α(SC-517380)：Santa Cruz；Bcl-2(RS-0032R)、Caspase-3(ab32351)和Caspase-9抗体(ab32539)：上海瑞齐生物科技公司。

1.3 康复训练器材 FT-200动物跑步机：成都泰盟软件公司；……