王萌萌，熊 丹，汤花梅，张水兰，阚丽娟，豆小文，李 悦，宗曾艳，张秀明△

1.广东省深圳市罗湖区人民医院医学检验科，广东深圳 518001；2.安徽理工大学医学院，安徽淮南 232001

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)核酸检测系统是一种将PCR与MALDI-TOF MS检测系统相结合用于高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型诊断的新方法。该法由多重PCR反应、单碱基延伸和飞行时间质谱分析三步构成，可准确快速地实现多基因多位点检测[1]。本研究依据《人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测及基因分型、试剂技术审查指导原则》[2]、医学实验室检测系统性能评价的相关要求和参考文件，对MALDI-TOF MS 检测系统检测18种HR-HPV核酸的准确度、检测下限和抗交叉反应能力进行评价，并将其检测结果与Cobas4800和之江HR-HPV 2种实时荧光定量PCR(qPCR)检测系统进行一致性评价，以期为病原体核酸质谱检测性能验证提供重要参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年9-11月在深圳市罗湖区人民医院进行宫颈癌筛查的患者的宫颈脱落细胞标本，初筛选取347份宫颈脱落细胞标本，其中罗氏保存液收集标本180份，之江保存液收集标本167份，标本保存在-80 ℃冰箱。纳入标准：(1)剩余标本量>2 mL的标本；(2)收集的阳性标本需涵盖HPV16、18型及其他12种罗氏检测型别。排除标准：影响检测结果的标本，如红细胞水平过高的标本。

1.2仪器与试剂 Cobas x480全自动核酸提取仪、Cobas z480 qPCR仪及其配套试剂盒均购自美国罗氏公司；Autrax全自动核酸提取工作站及其配套试剂盒购自上海之江公司；Smart32半自动核酸提取仪、Applied Biosystems Veriti 384 qPCR扩增仪、Heraeus fresco 21离心机均购自美国Thermo Fisher Scientific公司； ……