胡亮，方磊，李瑞莲，王湘波，周明

湖南省药品检验研究院，湖南药用辅料检验检测中心，湖南省药品质量评价工程技术研究中心，湖南 长沙 410001

土牛膝最早记载于《本草纲目》，指各地野生的牛膝，为苋科植物牛膝Achyranthes bidentataB1.的干燥根，其功效为“活血散瘀、祛风利尿，坠胎”［1］；肖步丹《岭南采药录》［2］中记载土牛膝的来源之一为粗毛牛膝Achyranthes aspera L.的根。土牛膝作为西南地区瑶族和土家族常用的民族药，应用十分广泛，但未有国家统一的药材标准，其中《湖南省中药材标准》2009 年版、《贵州省中药材标准》2003 年版收载的植物基原为苋科植物粗毛牛膝AchyranthesasperaL.的干燥根及根茎；《江苏省中药饮片炮制规范》1980 年版收载了3 个基原，分别为粗毛牛膝、野生牛膝和柳叶牛膝；现行其余质量标准收载基原均为野生牛膝［3-4］。土牛膝的现行质量标准包括性状、显微鉴别和薄层色谱鉴别项目，通过品种考证、药用资源分布调查发现，3 种土牛膝药材外观形态较相似，不易区分，存在不同基原混用的情况。

近年来，随着分子生物学技术的快速发展，植物DNA 条形码被大量应用于不同基原药材的鉴定，陈士林等［5］首次提出将ITS2 序列作为药用植物鉴定的通用条形码序列。DNA 条形码鉴定技术在中药药材鉴定中具有不受个体形态特征、药用部位、鉴定经验等限制的优点，克服了传统鉴定方法的诸多缺陷［6-10］。其中植物核糖体DNA 内转录间隔区（rDNA/ITS 区）序列进化速率快，可以提供丰富的变异位点和信息位点［11］。本研究首次应用ITS 和MatK 条形码对3 种植物基原土牛膝药材及其混伪品（川牛膝、广东土牛膝）进行鉴定研究，为土牛膝的快速准确鉴定提供新的技术手段。……